[发明专利]呈味活性肽及其制备方法与应用

权利要求书

1.呈味活性肽的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）粗酶的制备：10～30g麸皮，5～20g花生粕和0.01～0.1g氯化钙与15～50g去离子水混合均匀；在杀菌锅100～121℃中杀菌15～30min，冷却至20-38℃，接种米曲霉,在培养箱28～32℃培养48～72h；加入200mL-400mL水，在30-40℃水浴锅中搅拌0.5-2h；在4-10℃下5000～10,000 × g离心20～30min，取上清液冷冻干燥得粗酶；

（2）酶解：按花生粕与水质量比1：4～1：8加水，加入占花生粕质量0.4～1%的所述粗酶，在45～55℃酶解8～15h；85～95℃加热15～30min灭酶终止酶解反应，离心分离，得到花生粕酶解液；

（3）将酶解液过分子量为3000Da的超滤膜,取透过液，冷冻干燥，得粉末A；

 (4) 将粉末A溶于去离子水中使其浓度达到5～30 mg/mL,以去离子水为洗脱液,采用Sephadex G-25凝胶柱进行洗脱，收集目标峰，浓缩，冷冻干燥，得粉末B；

（5）将粉末B溶于去离子水中使其浓度达到5～30 mg/mL，以质量浓度0.1-0.2%三氟乙酸水溶液为洗脱液，采用反相C18柱进行洗脱，收集两个目标峰，真空浓缩，冷冻干燥，得粉末C和D，C为呈味活性肽Ⅰ，D为呈味活性肽Ⅱ。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于步骤（5）中反相C18柱洗脱液的检测波长为214nm。

3.由权利要求1所述制备方法制得的一种呈味活性肽，其特征在于，呈味活性肽Ⅰ为具有Ser-Ser-Arg-Asn-Glu-Gln-Ser-Arg所示的氨基酸序列的活性肽。

4.由权利要求1所述制备方法制得的一种呈味活性肽，其特征在于，呈味活性肽Ⅱ为具有Glu-Gly-Ser-Glu-Ala-Pro-Asp-Gly-Ser-Ser-Arg所示的氨基酸序列的活性肽。

5.权利要求1制得的呈味活性肽Ⅰ或呈味活性肽Ⅱ或它们的钠盐应用于食品中，增加食品的鲜味。