[发明专利]一种检测电离辐射剂量的生物学方法无效
申请号: | 201110333811.X | 申请日: | 2011-10-28 |
公开(公告)号: | CN102508283A | 公开(公告)日: | 2012-06-20 |
发明(设计)人: | 邵春林;袁德晓;叶爽;潘燕;张江虹;白杨 | 申请(专利权)人: | 复旦大学 |
主分类号: | G01T1/02 | 分类号: | G01T1/02;C12Q1/02 |
代理公司: | 上海正旦专利代理有限公司 31200 | 代理人: | 陆飞;盛志范 |
地址: | 200433 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 电离辐射 剂量 生物学 方法 | ||
1.一种检测电离辐射剂量的生物学方法,其特征在于具体步骤如下:
(1)、取辐射敏感性细胞株,分为低剂量和高剂量照射组,照射剂量小于10cGy的为低剂量照射组,照射剂量大于40cGy为高剂量照射组;
(2)、松胞素B处理:照射后,立即向细胞培养液内加入松胞素B,终浓度为2-6μg/ml,37℃温箱继续培养24-36h;
(3)、低渗处理:细胞离心弃上清后,每管细胞加入5-10ml 0.075M KCl混匀,室温低渗10-20min;
(4)、固定液固定:采用两步固定法,低渗后加入固定液,按质量比,固定液:低渗液=1:5-8,滴管混匀后立即离心,弃上清每管加入5-8ml固定液固定20-30min;所述固定液为甲醇和冰醋酸混合溶液,按质量比为甲醇:冰醋酸=7-9:1;
(5)、双核和四核细胞的判断:除产生正常的双核细胞外,对于一大一小的两个细胞核,如果小核的大小超过细胞核的1/3,将此类细胞也记为双核细胞;对于四核细胞的判断标准为,所有大于3个核的细胞均记为四核细胞;每个样品,统计细胞数不少于1000;
(6)、通过统计细胞四核率,对低剂量辐射进行定量,通过统计细胞双核率,对高剂量辐射进行定量;双核率=双核细胞数/N,四核率=四核细胞数/N,N为统计细胞数,N不少于1000。
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