[发明专利]一种抑制HIV-1耐药病毒复制的方法

说明书

技术领域

本发明涉及新的药物应用领域。涉及一种抑制HIV-1耐药病毒复制的新方法。

背景技术

目前艾滋病治疗主要使用的药物可分为核苷类逆转录酶抑制剂，非核苷类逆转录酶抑制剂，蛋白酶抑制剂，融合抑制剂。这些药物的作用机理分别是作用于HIV-1复制的不同阶段，其长期使用可使艾滋病病毒产生耐药性。例如HIV-1融合抑制剂T20，已有报道体外可诱导T20耐药变株，突变株对T20敏感性下降5～684倍，临床也分离到T20耐药变株，对T20敏感性下降4～422倍。对临床常用的蛋白酶抑制药如奈非那韦，沙奎那韦，洛匹那韦等，若长期使用也会产生耐药性而使药物的敏感性下降。为了减少耐药突变所占的比率，使药物更有效地抑制HIV-1的复制，阻止新突变的产生，按照艾滋病病毒的复制阶段，研制新靶点的药物是克服艾滋病药物耐药性的一种方法。

Rev蛋白质是HIV-1病毒复制所必需的蛋白质，该蛋白质需要从细胞核输出到细胞质而发挥其蛋白质的作用。这一输出依赖Rev蛋白质的核外输出信号和受体蛋白质即染色体区域维持物(CRM1)相结合，因此阻止Rev蛋白质的核外输出信号和受体蛋白质CRM1相结合是一种新的战略被用于抑制HIV-1复制。因为抑制Rev蛋白质的功能和目前艾滋病治疗使用的药物的作用机理不同，因此Rev蛋白质的功能抑制剂预期可以有抗HIV-1耐药病毒感染的新作用。

1’-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯被发现能阻止Rev蛋白质的核外输出信号和受体蛋白质CRM1相结合而抑制了HIV-1病毒的复制。因为抑制Rev蛋白质的作用和目前临床艾滋病治疗使用的药物的作用靶点不同，本发明证明了1’-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯及其衍生物能有效抑制HIV-1耐药病毒的复制。

发明内容

目前使用的抗艾滋病药物分为核苷类逆转录酶抑制剂，非核苷类逆转录酶抑制剂，蛋白酶抑制剂，融合抑制剂，因为不能彻底根除体内的HIV-1病毒，需要长时间服用这些药物，因此HIV-1病毒易引起高的突变率而对各种艾滋病药物产生耐药性。因为1’-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯及其衍生物抑制HIV-1病毒复制的靶点是抑制HIV-1的Rev蛋白质在病毒复制时应起的作用，和目前艾滋病药物的靶点不同，因此选用该类化合物对HIV-1耐药病毒株如HIV-1融合抑制剂及蛋白酶抑制剂的耐药病毒株进行了抗耐药病毒活性的筛选实验。

1’-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯及其衍生物实验样品的制备

1’-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯，其立体结构可以是1’S型，即1’(S)-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯，也可以是1’R型，即1’(R)-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯，也可以是二者混和物。本实验所用样品为1’(S)-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯。

1’(S)-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯实验样品的制备，可以从天然植物中提取分离精制而制备，也可以通过化学合成法制备。本实验所用样品是从天然植物大高良姜的根茎中提取分离精制而制备。其制备方法为：取大高良姜干燥的根茎，切碎，用甲醇提取，合并提取液，减压浓缩，甲醇提取物通过硅胶层析柱用正己烷与乙酸乙酯混合液作为溶媒进行梯度洗脱分离，收集正己烷与乙酸乙酯混合液(10∶1)洗脱物，减压浓缩。浓缩的洗脱物用制备型碳18反相高效液相色谱柱进一步进行样品精制，流动相用甲醇∶水(4∶1)。精制所得化合物根据比旋光度，核磁共振及质谱的分析数据确定其化学结构为1’(S)-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯化合物。测定该化合物的数据为：[α]_D²⁰-40.5°(c 1.0，乙醇)。¹H NMR(CDCl₃)δ：7.35(2H，d，J＝8.5Hz)，7.01(2H，d，J＝8.5Hz)，6.35(1H，d，J＝6.4Hz)，5.96(1H，ddd，J＝17.1，11.0，6.4Hz)，5.32(2H，m)，2.30(3H，S)，2.15(3H，S)。MSm/z：235(M+H)⁺。