[发明专利]一种改进的考马斯亮蓝测定蛋白质的光度法有效
| 申请号： | 201110319907.0 | 申请日： | 2011-10-20 |
| 公开（公告）号： | CN102507466A | 公开（公告）日： | 2012-06-20 |
| 发明（设计）人： | 魏琴;杜斌;韩颜颜;吴丹;毛珂霞;李贺;马洪敏;朱宝存;范大伟;李燕;李慧芝;罗川南;庞雪辉;朱沛华;赵燕芳;蔡燕燕;魏东 | 申请（专利权）人： | 济南大学 |
| 主分类号： | G01N21/31 | 分类号： | G01N21/31 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 250022 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 改进 马斯 测定 蛋白质 光度 | ||
1.一种改进的考马斯亮蓝测定蛋白质的光度法，其特征包括以下步骤：
(1)在考马斯亮蓝法基础上加入一种增稳增敏剂，所述增稳增敏剂为自配的微乳液；
(2)优化测定步骤，从而提高测定体系的稳定性和灵敏度。
2.根据权利要求1所述的一种改进的考马斯亮蓝测定蛋白质的光度法，其特征是所述的考马斯亮蓝选用考马斯亮蓝G-250，其分子式为：C47H48N3O7S2Na。
3.根据权利要求1所述的一种改进的考马斯亮蓝测定蛋白质的光度法，其特征是所述的微乳液选自下列之一：OP-10微乳液、Triton X-100微乳液、Tween-20微乳液、Tween-80微乳液。
4.根据权利要求1所述的一种改进的考马斯亮蓝测定蛋白质的光度法，其特征是微乳液所含成分的质量比为x∶正丁醇∶正庚烷∶水＝(1～10)∶(1～5)∶(0.2～2)∶(83～97.8)，x代表OP-10、Triton X-100、Triton X-10、Tween-20或Tween-80，优化的增稳增敏剂是OP-10微乳液。
5.根据权利要求1中所述的一种改进的考马斯亮蓝测定蛋白质的光度法，其特征是优化的步骤为：依次加入考马斯亮蓝G-250溶液(10.0μg·mL-1)、OP-10微乳液，然后依次加入浓度递增的蛋白质溶液，水定容摇匀，静置一段时间，采用分光光度计在580～610nm处对试剂空白测定吸光度A，绘制工作曲线。
6.根据权利要求1所述的一种改进的考马斯亮蓝测定蛋白质的光度法，其特征为：在蛋白质工作曲线线性范围内，优化的考马斯亮蓝G-250染色液的用量为0.10～4.00mL，优化的OP-10微乳液的用量为1.00～10.00μL，优化的染色液、增稳增敏剂与蛋白质混合后的稳定时间为10～240min。
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