[发明专利]利用色素合成酶辅助因子诱导小球藻合成虾青素的方法

权利要求书

1.一种利用色素合成酶辅助因子诱导小球藻合成虾青素的方法，其特征在于：

(1)活化培养：将小球藻(Chlorella zofingiensis)在液体培养基中活化培养，获得同步化生长的藻液，待用；

(2)诱导培养：取步骤(1)中生长到处于指数生长期的藻液，并向藻液中添加色素合成酶辅助因子，同时补充碳源和氮源进行培养，收集培养后菌株细胞破壁提取虾青素。

2.按权利要求1所述的利用色素合成酶辅助因子诱导小球藻合成虾青素的方法，其特征在于：

所述活化培养是将小球藻(C.zofingiensis)培养于液体培养基中振荡发酵养，培养条件为温度20-30℃，光强0-200μmol m^-2s^-1，转速100-200rpm，光暗比为12-24h/12-24h。

3.按权利要求1或2所述的利用色素合成酶辅助因子诱导小球藻合成虾青素的方法，其特征在于：所述液体培养基为Kuhl、BG-11、BBM、Basa1、CZ-M1、KM1中的一种。

4.按权利要求3所述的利用色素合成酶辅助因子诱导小球藻合成虾青素的方法，其特征在于：所述Kuhl培养基为：10g/L葡萄糖、1g/L硝酸钾、89mg/L十二水磷酸氢二钠、621mg/L二水磷酸二氢钠、246mg/L七水硫酸镁、9.3mg/L EDTA、6.9mg/L七水硫酸亚铁、14.7mg/L二水氯化钙、0.29mg/L七水硫酸锌、0.17mg/L一水硫酸锰、0.06mg/L硼酸、0.002mg/L五水硫酸铜、0.012mg/L四水钼酸铵、1000ml水，pH 6.5。

5.按权利要求3所述的利用色素合成酶辅助因子诱导小球藻合成虾青素的方法，其特征在于：所述诱导培养为取步骤1)中生长到处于指数生长期的藻液，并向藻液中添加色素合成酶辅助因子，同时补充碳源和氮源进行振荡发酵养培养，培养条件为温度20-30℃，光强0-200μmol m^-2s^-1，转速100-200rpm，光暗比为12-24h/12-24h；直至藻体细胞内虾青素的积累量最高时培养结束，采收细胞破壁提取虾青素。

6.按权利要求1或5所述的利用色素合成酶辅助因子诱导小球藻合成虾青素的方法，其特征在于：所述色素合成酶辅助因子为Mg、Zn、Cu、Fe、Mn中的一种或几种；并且其一次性添加或流加，流加量控制在0.02-20mM。

7.按权利要求1或5所述的利用色素合成酶辅助因子诱导小球藻合成虾青素的方法，其特征在于：所述碳源为无机碳源和/或有机碳源；所述氮源为无机氮源和/或有机氮源；并且其一次性添加或流加，碳源和氮源添加量控制在C/N比100-300。

8.按权利要求7所述的利用色素合成酶辅助因子诱导小球藻合成虾青素的方法，其特征在于：所述无机碳源为二氧化碳、碳酸盐、碳酸氢盐中的一种或几种；所述有机碳源为葡萄糖、蔗糖、果糖、甘油、乙醇、醋酸盐中的一种或几种。

9.按权利要求7所述的利用色素合成酶辅助因子诱导小球藻合成虾青素的方法，其特征在于：所述无机氮源为硝酸盐、铵盐、氨水中的一种或几种；所述有机氮源为尿素、酵母粉、蛋白胨中的一种或几种。