[发明专利]大孔吸附树脂提取纯化山橿总黄酮的方法

说明书

技术领域

本发明涉及医药领域，特别是一种大孔吸附树脂提取纯化山橿总黄酮的方法。

背景技术

山橿Lindera reflexa Hemsl.系樟科Lauraceae山胡椒属植物，为灌木或小乔木。主要分布于河南(大别山、桐柏山和伏牛山南部)、江苏、安徽等地，而河南信阳地区分布最广泛，且产量丰富，是山橿的主要产地。山橿根或根皮入药，性温，味辛，具有行气止痛，健脾消积，活血消肿等作用，且山橿在长期的临床应用中收到良好的效果。在河南省民间用于治疗慢性胃炎，胃溃疡已取得确切的临床疗效，而且有很长的历史。由于其良好的临床疗效和丰富的蕴藏资源，被收入《河南省地方药材标准》。

虽然山橿在临床上有确切的治疗脾胃虚寒性胃炎、胃溃疡等作用，由于良好的临床疗效而备受人们关注，但有效部位不明确，缺乏系统的药理跟踪研究。本发明结合临床疗效，建立多个药理模型，以药理实验为导向，进行有效部位和有效成分的系统研究，阐明其疗效的物质基础，以便为山橿的进一步开发利用提供科学的依据。为了明确这一临床却有疗效的有效部位，建立能确切反映该药临床疗效的控制方法，控制有效部位的质量。由于山橿资源广泛，价格低廉，对抗炎、抗溃疡和镇痛的有效部位、活性成分进行深入研究，将其开发成治疗胃病的新药，既会创造显著的经济效益，也将产生良好的社会效益；更重要的是对胃病的治疗将起到很大的推动作用。研究表明，山橿主要活性成分有黄酮类(或称总黄酮)，生物碱类和挥发油类，以球松素为代表的总黄酮为主要有效活性成分，并具有很好的治疗胃溃疡及镇痛抗炎的功效，那么，如何将山橿总黄酮纯化提取出来是本领域技术人员一直在研究解决的问题，但至今未见有公开的报导。

发明内容

针对上述情况，克服现有技术之缺陷，本发明之目的就是提供一种大孔吸附树脂提取纯化山橿总黄酮的方法，可有效解决从山橿中提取纯化总黄酮，以满足制备治疗胃溃疡及镇痛抗炎药物的问题。

本发明解决的技术方案是，由以下步骤实现：

1、制备山橿提取物溶液：将山橿粉碎成粉，然后加质量浓度为60-80％的乙醇(或称为60-80％乙醇，以下同)超声提取2-4次，每次提取40-90分钟，每次60-80％乙醇的加入量为山橿重量的10-14倍；合并提取液，减压回收乙醇至提取液无醇味，得浓缩液，浓缩液加水稀释成相当于每1ml含生药0.05mg(0.05mg/ml生药)的山橿提取物溶液，备用；

2、大孔吸附树脂处理：方法是，将大孔吸附树脂先用95％乙醇浸泡12h后，用95％乙醇清洗至乙醇洗脱液与水混合不呈白色混浊，再用蒸馏水洗至无醇味，备用；

3、湿法装柱：取树脂柱子，按树脂柱子直径与柱高比1∶7-9的比例，用步骤2处理过的大孔吸附树脂湿法装柱；

4、上样纯化提取：取步骤1制备的山橿提取物溶液上样，上样量为大孔吸附树脂重量的4-6倍，上样流速为1.0ml/min，上样完成后静置2h，用大孔吸附树脂4-6倍重量的纯水冲洗除杂质，再用大孔吸附树脂4-6倍重量的70-90％乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，得山橿根有效部位的纯化山橿总黄酮。

本发明方法简单，稳定可靠，所得提取物山橿总黄酮，有效用于制备治疗胃溃疡及镇痛抗炎药物，开拓了山橿药用价值，是药物上的创新。

具体实施方式

以下结合实施例对本发明的具体实施方式作详细说明。

实施例1

本发明在具体实施中，是由以下步骤操作的：

1、制备山橿提取物溶液：将山橿粉碎成粉，然后加质量浓度为70％的乙醇(或称为70％乙醇，以下同)超声提取3次，每次提取1小时，每次70％乙醇的加入量为山橿重量的12倍；合并三次的提取液，减压回收乙醇至提取液无醇味，得浓缩液，浓缩液加水稀释成相当于每1ml含生药0.05mg(0.05mg/ml生药)的山橿提取物溶液，备用；

2、大孔吸附树脂处理：方法是，将大孔吸附树脂先用95％乙醇浸泡12h后，用95％乙醇清洗至乙醇洗脱液与水混合不呈白色混浊，再用蒸馏水洗至无醇味，备用；

3、湿法装柱：取树脂柱子，按树脂柱子直径与柱高比1∶8的比例，用步骤2处理过的大孔吸附树脂湿法装柱；

4、上样纯化提取：取步骤1制备的山橿提取物溶液上样，上样量为大孔吸附树脂重量的4倍，上样流速为1.0ml/min，上样完成后静置2h，用大孔吸附树脂4倍重量的纯水冲洗除杂质，再用大孔吸附树脂4倍重量的70％乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，得山橿根有效部位的纯化山橿总黄酮。

实施例2

本发明在具体实施中，还可由以下步骤实现：