[发明专利]建立多代肥胖和脂肪肝病变小鼠模型的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种小鼠模型的建立，具体地说是建立多代高脂食物喂养加速肥胖和脂肪肝病变小鼠模型的方法，建立的小鼠模型可以用于研究高脂食物对肝脏和肥胖的跨代影响。

背景技术

超重和肥胖已成为了世界各国十分关注的公共健康问题。在美国有三分之二的成年人是超重或者肥胖的，欧洲和其他发达国家有超过一半的成年人是超重或者肥胖的。中国人曾经是体型偏瘦的群体。随着社会经济的发展，人们的生理上的活动或负重劳动显著减少，中国超重和肥胖的人数有迅速赶上西方国家的势头。2002年国家营养与健康调查显示中国有1.84亿的人是属于超重人群，有0.31亿的人是属于肥胖人群。从1992年到2002年这十年时间内，肥胖人群增加了两倍。肥胖会增加多种疾病发生的风险，如高血压、2型糖尿病、脂肪肝、乳腺癌等。

非酒精性脂肪肝(NAFLD non-alcoholic fatty liver disease)表现为在肝脏中过多的甘油三酯的积累，其病理变化随病程的进展而表现为简单的脂肪变性、脂肪性肝炎、肝硬化和肝炎。随着我国经济的快速发展，人民生活水平的日益提高，非酒精性脂肪肝的发病率呈明显上升趋势，已成为一种危害人类健康的慢性疾病。研究表明，在西方国家中成人非酒精性脂肪肝的发病率已达到25％，我国部分地区NAFLD的发病率也达到15％，肥胖及二型糖尿病患者中非酒精性脂肪肝的发病率可高达到80％-90％。

肥胖和NAFLD主要发生在中老年人群中，然而近年来青少年的发病率显著增加。成人的肥胖和NAFLD高发病率可以用人们活动量的减少以及不成比例的高脂食物的摄取导致的肥胖和二型糖尿病来解释，而青少年的肥胖和NAFLD发病率的增加的原因不是很清楚。1995年，英国MRC环境流行病学研究所David Barker博士和同事提出了人类疾病的胚胎源性的理论(The fetal origins hypothesis)该假说提出了由于营养不良而产生的胎儿生长限制，对以后疾病的产生以及人体的生理和结构有着长期的影响。几十年以来人们不断发现新的证据支持Barker理论。胎儿起源的成人疾病(FOAD，Fetal Origins ofAdult Disease)是一类与胎儿发育和儿童早期的因素有关的常见病，例如过度肥胖、糖尿病、冠状血管性心脏病、高血压、慢性肾脏疾病等。研究表明，母亲肥胖或者妊娠期糖尿病的婴儿在青少年时期更早的倾向于肥胖和二型糖尿病；母亲肥胖的啮齿类动物的子代有更高的风险或者更容易产生肥胖和NAFLD。

肝脏是人体中控制糖和脂代谢的主要器官。研究表明，在高脂食物喂养的小鼠和基因缺失的小鼠的肝脏中脂肪的存储增加和脂类从头合成会导致肥胖和NAFLD。肝X受体的表达异常引起乙酰辅酶A羧化酶和脂肪酸合成酶水平的升高，从而导致肥胖和脂肪肝。

动物模型是用人为的方法，使动物在一定的致病因素(物理的、化学的、生物的)作用下，造成动物组织、器官或全身一定损害，出现某些类似人类疾病的功能、代谢、形态结构方面的变化或各种疾病，通过这种手段来研究人类疾病的发生、发展规律，为研究人类疾病的预防、治疗(包括新药物试用)提供理论依据。近40年来，学者们采用多种方法建立了不同脂肪肝模型，然而，这些模型均不适用于肥胖和脂肪肝的跨代影响研究。

发明内容

本发明的目的在于针对上述不足，提供一种建立多代高脂食物喂养加速肥胖和脂肪肝病变的方法，用于研究高脂食物对肝脏的跨代影响。

为实现上述目的，本发明建立多代高脂食物喂养加速肥胖和脂肪肝病变小鼠模型的方法包括如下步骤：

1、一种建立多代肥胖和脂肪肝病变小鼠模型的方法，其包括如下步骤：

1)将正常食物喂养的C57BL/6雌鼠和雄鼠在4-6周龄大时分别用正常(NC)和高脂(如含34.9％的猪油)食物(HF)喂养，以得到第1代鼠(F0)，即为NC F0和HF F0组。其中1代雌鼠在利用不同食物喂养至性成熟(一般一个月)与正常食物喂养的雄鼠进行繁育，以得到第2代鼠(F1)。NC F0组雌鼠的子代为NC F1组。HF F0组雌鼠的子代为HF F1组。

2)将NC F1组和HF F1组的小鼠断奶分别持续喂养正常和高脂食物。HF F1和NC F1组雌鼠在分别饲喂正常和高脂食物至性成熟(一个月，8周龄大)与正常食物喂养的雄鼠进行繁育，以得到第3代鼠(F2)。NC F1组的雌鼠的子代为NC F2组，HF F1组的雌鼠的子代则为HF F2组。

3)NC F2组和HF F2组的小鼠断奶后分别持续喂养正常和高脂食物。