[发明专利]人脂联素ELISA试剂盒有效
| 申请号： | 201110307413.0 | 申请日： | 2011-10-12 |
| 公开（公告）号： | CN102517256A | 公开（公告）日： | 2012-06-27 |
| 发明（设计）人： | 陶凌;屈延;廉坤;杨璐;金伯泉 | 申请（专利权）人： | 陶凌 |
| 主分类号： | C12N5/20 | 分类号： | C12N5/20;G01N33/577;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京鼎佳达知识产权代理事务所(普通合伙) 11348 | 代理人： | 蒋常雪 |
| 地址： | 710032 陕西省西安市长*** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 人脂联素 elisa 试剂盒 | ||
1.用于制备抗人脂联素单克隆抗体的一对杂交瘤细胞株：
杂交瘤细胞株XA187 No.1，中国典型培养物保藏中心，武汉，保藏编号CCTCCNO：C201160，
杂交瘤细胞株XA187 No.19，中国典型培养物保藏中心，武汉，保藏编号CCTCCNO：C201161。
2.如权利要求1所述的一对杂交瘤细胞株在制备人脂联素ELISA试剂盒中的应用。
3.如权利要求1所述的一对杂交瘤细胞株在制备人脂联素ELISA试剂盒中的应用，其特征在于：
杂交瘤细胞株XA187 No.1制备检测抗体；
杂交瘤细胞株XA187 No.19制备包被抗体。
4.一种人脂联素ELISA试剂盒，其特征在于：其组成如下：
(1)预包被抗人脂联素单克隆抗体的96孔酶标板1块；该单克隆抗体来自于权利要求1所述的杂交瘤细胞株XA187 No.19；
(2)样品稀释液1瓶250ml，其为含10％小牛血清的磷酸盐缓冲液；
(3)检测抗体工作液1瓶12ml，其含有辣根过氧化物酶标记的抗人脂联素单克隆抗体；该单克隆抗体来自于权利要求1所述的杂交瘤细胞株XA187 No.1；
(4)底物稀释液1瓶12ml，其含pH5.0磷酸盐-柠檬酸盐缓冲液和3％过氧化氢；
(5)底物2，2’-连氮基-双-(3-乙基苯并二氢噻唑啉-6-磺酸)二铵盐1瓶6mg
(6)洗涤液1瓶50ml，其为含1.0％吐温-20的pH7.420×磷酸盐缓冲液；
(7)标准品2管，每管含人脂联素冻干粉100ng；
(8)非离子活性剂，聚氧乙烯辛基酚醚、聚氧乙烯烷基酚醚或聚氧乙烯脂肪醇醚5ml，在稀释液添加之后，按照10μL非离子活性剂/1mL稀释液的比例添加。
5.如权利要求1所述的人脂联素ELISA剂盒在制备检测人脂联素含量的试剂中的应用。
6.如权利要求1所述的用于制备抗人脂联素单克隆抗体抗原的引物：
上游引物：5’-CGGGGTACCATGCTGTTGCTGGGAGCTGTTCTACTGCTATTAGCTC-3’
下游引物：5’-CCGGAATTCTCAGTGATGGTGGTGGTGATGGTTGGTGTCATGGTAG-3’。
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