[发明专利]邻苯二甲酸酯类环境激素高效降解菌剂的制备方法

权利要求书

1.一株高效降解邻苯二甲酸酯类环境激素的微生物菌株，其特征在于：该菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC No.5276，分类命名为Gordonia sp.QH-11。

2.利用权利要求1所述菌株制备邻苯二甲酸酯类环境激素高效降解菌剂的方法，其特征在于：以甘薯淀粉废水为主要培养基原料，菌剂的制备步骤包括：

(1)培养基配制：

1)菌种保藏培养基(固体，1L)：甘薯淀粉废水1L，酵母膏5g，氯化钠5g，琼脂20g，调pH 7.0-7.5；

2)菌种活化培养基(液体，1L)：甘薯淀粉废水1L，酵母膏5g，氯化钠5g，调pH 7.0-7.5；

3)种子培养基(液体，10L)：K₂HPO₄38g，KH₂PO₄15g，(NH₄)₂SO₄10g，MgCl₂1.6g，CaCl₂0.2g，Na₂MoO₄·2H₂O 0.024g，FeCl₃0.018g，MnCl₂·2H₂O 0.015g，DBP 5g，甘薯淀粉废水1L，加水至10L，调pH＝7.0-7.5；

4)发酵培养基(液体，200L)：甘薯淀粉废水200L，调pH 7.0-7.5；

以上培养基均在115℃灭菌15-30min；

(2)菌种活化：挑取PAEs降解菌至菌种保藏培养基，30℃连续划线、挑单菌落培养两次后，挑取单菌落在菌种活化培养基中，于30℃，150-200r/min摇床振荡培养12-36h；

(3)液体种子制备：向装有高温灭菌后的种子培养基的发酵罐中，按照体积比5％-10％的接种量接种活化的PAEs降解菌，于25-37℃，通空气培养12-36h，得到液体种子；

(4)液态发酵：向装有高温灭菌后的发酵培养基中的发酵罐中，按照体积比5％-10％的接种量接种PAEs降解菌液体种子，于25-37℃，通空气培养18-60h，得到活菌体液体培养物；

(5)菌剂制备：培养好的发酵液经细菌计数后，超滤浓缩，调节至10⁹CFU/mL，加入质量分数为0.5％的甘氨酸和质量分数为1.5％的甘油，灌装保藏。