[发明专利]一种同时制备鬼臼苦酮和鬼臼苦素的工艺方法

说明书

技术领域

本发明涉及从天然植物中制备活性成分的方法，具体地说，涉及一种同时制备鬼臼苦酮和鬼臼苦素的工艺方法。

背景技术

鬼臼苦酮(picropodophyllone，C₂₂H₂₀O₈)、鬼臼苦素(podophyllotoxin，C₂₂H₂₂O₈)属于木脂体类(lignans)，主要存在于小檗科多年生草本类群鬼臼亚科八角莲属、窝儿七属、桃儿七属、山荷叶属及足叶草属植物中。这些植物由于都具有盾状着生的叶，茎中具有多数散生微管束，花不具蜜腺，浆果含鬼臼苦素等一些共同特征而被看作一个自然而相对独立的类群，习惯上称为鬼臼类植物。鬼臼类植物是一类含有显著生物活性，具有悠久应用历史的药用植物。我国汉代的《神农本草经》中就有鬼臼的记述。该类植物具有抗肿瘤、祛痰止咳、抗炎和抗病毒等作用，其根、茎及叶中含有大量具有抗癌活性的木脂素类成分。其中，鬼臼苦酮和鬼臼苦素是主要活性成分。

鬼臼苦酮：无色针晶，分子式C₂₂H₂₀O₈，分子量412.39；药理作用主要有：1.抗肿瘤作用，对P388、A-549、HT-29的IC₅₀都为5微克/毫升，对照药阿霉素的IC₅₀（微克/毫升）分别为0.017、0.053和0.11；2.抗病毒作用，对HSV/CV-1和VSV/BHK的IC₅₀（微克/毫升）分别为20和10；3.抗真菌作用，在200微克/毫升时，对絮状表皮癣菌、弯孢、稻黑孢、糙皮侧耳等有强抑制活性。

鬼臼苦素：无色细针晶，分子式C₂₂H₂₂O₈，分子量414.41；药理作用主要有抗肿瘤作用，对P388、A-549、HT-29的IC₅₀都＜2.5微克/毫升，对照药阿霉素的IC₅₀（微克/毫升）分别为0.017、0.053和0.11，对HSV/CV-1和VSV/BHK的IC₅₀（微克/毫升）分别＜20和10。

现有技术采用超声提取鬼臼苦素，而采用高速逆流色谱法纯化鬼臼苦酮和鬼臼苦素的方法尚未见文献报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种同时制备鬼臼苦酮和鬼臼苦素的工艺方法，以同时得到高纯度的鬼臼苦酮和鬼臼苦素。

为实现上述目的，本发明的技术方案如下：

1）将原料药材粉碎，置于萃取釜中，进行超临界CO₂萃取，解析，收集提取物；

2）取正己烷-乙酸乙酯-乙腈-水（3~5：3~6：4~8：5）均匀混合，充分饱和后，静置10-12小时，取上相为固定相，下相为流动相，将提取物用流动相溶解，将固定相泵入逆流色谱的螺旋管柱中，调节转速为800-1000rpm，以1.5-3ml/min的流速将流动相泵入，待机子稳定后进样，分别收集鬼臼苦酮和鬼臼苦素流分，浓缩、低温干燥即得鬼臼苦酮和鬼臼苦素。

所述原料药材来源于小檗科陕西窝儿七、南方山荷叶、多花八角莲、贵州八角莲、广西八角莲、桃儿七等植物的根茎或叶。

所述超临界萃取温度为35-50℃，萃取压力为22-40MPa，解析温度为18-40℃，解析压力为8-15MPa，CO₂流量为18-30L/h。

本发明的优势在于：

（1）采用超临界提取技术，高效无溶剂残留，对环境无污染；

（2）采用高速逆流色谱制备工艺，克服了固相载体带来的样品吸附、损失等缺点，且HSCCC法具有制备量大、易于工业推广等优点。

具体实施方式

下面结合实施例进一步对本发明加以说明：

实施例1：