[发明专利]一种制备萍蓬草素的方法

说明书

技术领域

本发明属于中药化学技术领域，具体涉及一种制备萍蓬草素的方法。

背景技术

萍蓬草素A（Nupharin A）和萍蓬草素B（Nupharin B）分子式均为C₄₁H₃₀O₂₆，分子量为938.67，CAS登录号分别81956-07-2、121916-42-5，是从睡莲科植物日本萍蓬草Nuphar japonicum DC.根茎、彩斑萍蓬草Nuphar variegatum Durand根中分离得到的鞣质类物质，萍蓬草素A熔点为243-245℃，为白色粉末（水）；萍蓬草素B熔点为258℃，为无色针晶（水）。药理研究表明，萍蓬草素A对金黄色葡萄球菌和酿酒酵母Sarcchomyces cerevisiae有抗菌作用，对拓扑异构酶Ⅱ型呈抑制活性，IC₅₀为0.2μM。萍蓬草素B对金黄色葡萄球菌和普通变形杆菌Proteus vulgaris有抗菌作用。

日本萍蓬草是一种在北半球温带广泛分布的多年生根茎状的草科植物，在亚洲地区一直被作医药品使用，含有多种生物碱和鞣质。吴霞等发现日本萍蓬草根茎甲醇提取物对醋霉菌果蝇幼虫有杀虫活性，然而对鞣质的研究较少，因此研究出一种制备日本萍蓬草鞣质的方法是非常必要的，对扩大药源以及萍蓬草属植物的综合利用具有重要意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种提取制备萍蓬草素的方法，该方法所得萍蓬草素A、B总量可达60-90%。

为了达到上述目的，本发明采用如下技术方案：将日本萍蓬草根茎加丙酮溶液微波提取，过滤，得提取液；将提取液浓缩后上大孔吸附树脂柱吸附，用不同浓度的乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，浓缩至无醇，加入明胶溶液，离心，将离心物用95%乙醇溶液溶解，过滤，滤液上葡聚糖凝胶柱，用50-90%丙酮溶液洗脱至无色，洗脱液浓缩干燥即得产品。

所述丙酮溶液为60-100%的丙酮水溶液，加入量为药材量的4-10倍，所述微波提取，提取时间为10-100min。

所述大孔吸附树脂选自HPD-400、ADS-7和S-8中的一种，洗脱剂为0-80%的乙醇水溶液，流速为1-2BV/h。

所述明胶溶液浓度为2-5%。

本发明工序简单，采用微波提取萍蓬草素提率高；大孔树脂和葡聚糖凝胶柱层析结合，分离效果好；且整个工艺条件温和，能耗低，适合工业化生产。

具体实施方式

下面将结合具体实施方式对本发明做进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

实施例1：

取原药材日本萍蓬草根茎1kg粉碎成粗粉投入提取罐中，加5L70%的丙酮水溶液进行微波提取，微波功率为400W，提取60min，过滤，得提取液，将提取液浓缩后上HPD-400大孔吸附树脂柱，待饱和吸附后，依次用0%、20%、50%、80%乙醇溶液洗脱，控制流速为1BV/h，收集富含萍蓬草素的洗脱液，将洗脱液浓缩至无醇，加入浓度为3%的明胶溶液，搅拌至不再有沉淀产生，离心，将离心物用95%乙醇溶液溶解，过滤，滤液上葡聚糖凝胶柱，先用去离子水洗脱除杂，再用70%丙酮溶液洗脱，控制流速为1BV/h，收集洗脱液，浓缩、干燥即得产品（萍蓬草素A和B总含量为86%）。

实施例2：

取原药材日本萍蓬草根茎1kg粉碎成粗粉投入提取罐中，加8L95%的丙酮水溶液进行微波提取，微波功率为380W，提取30min，过滤，得提取液，将提取液浓缩后上S-8大孔吸附树脂柱，待饱和吸附后，依次用0%、20%、50%、80%乙醇溶液洗脱，控制流速为2BV/h，收集富含萍蓬草素洗脱液，将洗脱液浓缩至无醇，加入浓度为2%的明胶溶液，搅拌至不再有沉淀产生，离心，将离心物用95%乙醇溶液溶解，过滤，滤液上葡聚糖凝胶柱，先用去离子水洗脱除杂，再用90%丙酮溶液洗脱，控制流速为2BV/h，收集洗脱液，浓缩、干燥即得产品（萍蓬草素A和B总含量为73%）。

实施例3：