[发明专利]从多重峰色谱图中剥离出单独峰的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种从多重峰色谱图中剥离出单独峰的方法。属于色谱定量和色谱峰形分析的改进技术。 

背景技术

多重峰是指由于柱温高、流动相流速大、柱效低或死体积大等原因造成待分离组分尚未完全分开而使得峰形叠加在一起的色谱峰形，实验室中常见的多重峰以3-5重为主。随着分析样品的日益复杂化和分离条件难以最优化，色谱图中多重峰的重叠现象日益显著。实现多重峰的剥离成为了色谱定量和峰形研究中的一个技术难题。针对于这种难题的解决办法，传统上往往采用垂直切割法和切线法。但是这两种方法只能对于正常的拖尾峰具有较好的定量结果，对于一些不规则的峰形定量误差往往超过20％。范国樑等确定了色谱二重峰中剥离出单独峰的方法(ZL200410094021)，将定量误差控制在5％以内。但是这种方法仅仅局限于二重峰的剥离定量，对于多重峰的剥离定量无能为力。同时，该方法通过修正的塔板理论实现对单独峰的模拟，方法繁琐、参数较多且实施起来难度较大。因此，一种适用性更为广泛、实施简单、定量误差小的方法有待开发。 

发明内容

本发明的目的在于提供一种从多重峰色谱图中剥离单独峰方法，该方法具有实用性更为广泛、实施简单、定量误差小的特点，它为色谱定量和峰形研究提供技术支持。 

本发明是通过下述技术方案加以实现的，一种从多重峰色谱图中剥离出单独峰的方法，其特征在于包括以下过程： 

1.第一次拟合： 

(1)根据多重峰的形状，以确定极大值的方法准确确定多重峰中每个峰的顶点，以所确定的顶点近似替代第一次拟合单独峰的顶点； 

(2)依据步骤(1)所确定的多重峰的每个峰的顶点，以及以多重峰的前沿和后沿构造出各个单独峰的前沿和后沿：读出多重峰的每个峰的顶点的纵坐标、多重峰前沿最高点的纵坐标和后沿最高点的纵坐标，根据每个峰的顶点的纵坐标与多重峰前沿最高点的纵坐标之比求出纵向修正系数a₁，a₂……a_n，再由a₁，a₂……a_n的值乘以多重峰的前沿曲线的各点纵坐标确定每个单独峰的前沿；根据每个峰的顶点的纵坐标与多重峰后沿最高点的纵坐标之比求出纵向修正系数b₁，b₂……b_n，再由b₁，b₂……b_n值乘以多重峰的后沿曲线的各点纵坐标确定每个单独峰的后沿； 

(3)将步骤(2)所确定的每个单独峰的前沿和后沿平移到依据步骤(1)所确定的每个峰的顶点，构成独立的n个单独峰，则完成了第一次单独峰的拟合； 

2.第一次迭代： 

用多重峰的峰形减去第一次拟合得到的单独峰2、3……n的叠加峰形，第一次迭代出单独峰1的峰形；用多重峰的峰形减去第一次拟合得到的单独峰1，3……n的叠加峰形，第一次迭代出单独峰2的峰形；……；用多重峰的峰形减去第一次拟合得到的单独峰1，2……n-1的叠加峰形，第一次迭代出单独峰n的峰形； 

3.第二次拟合： 

(1)依据步骤2所确定的第一次迭代的每个单独峰的顶点，以及以第一次迭代单独峰1的前沿和第一次迭代单独峰n后沿构造出第二次拟合单独峰的前沿和后沿：读出第一次迭代出的每个单独峰的顶点的纵坐标、第一次迭代计算出的单独峰1的前沿最高点的纵坐标和单独峰n的后沿最高点的纵坐标，根据每个第一次迭代单独峰的顶点的纵坐标与第一次迭代单独峰1的前沿最高点的纵坐标之比求出纵向修正系数a₁，a₂……a_n，再由a₁，a₂……a_n的值乘以第一次迭代单独峰1的前沿曲线的各点纵坐标，确定出第二次拟合的每个单独峰的前沿；根据每个第一次迭代单独峰的顶点的纵坐标与第一次迭代出的单独峰n后沿最高点的纵坐标之比求出纵向修正系数b₁，b₂……b_n，再由b₁，b₂……b_n的值乘以第一次迭代出的单独峰n的后沿曲线的各点纵坐标，确定出第二次拟合的每个单独峰的后沿； 

(2)将步骤(1)所确定的第二次拟合的每个单独峰的前沿和后沿平移到依据步骤2所确定第一次迭代的每个单独峰的顶点，构成第二次拟合的n个单独峰； 

4.第二次迭代：