[发明专利]一种马钱子总生物碱的提取方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种中药有效成分的提取方法，特别是涉及一种从中药马钱子中提取马钱子总生物碱的方法，属于药物技术领域。

背景技术

马钱子又名番木鳖，始载于《本早纲目》，味苦，寒性，有大毒，归肝，脾经，功效为通络止痛，散结消肿。临床上用与风湿顽痹，麻木瘫痪，跌打损伤，痈疽肿痛，小儿麻痹后遗症，类风湿性关节炎等疾病；但具有剧毒的特性严重影响其在临床上的应用，所谓“毒药猛剂善起沉疴”。马钱子的治疗量为0.3-0.6g，过量易出现中毒，如何合理安全使用马钱子，成为近年的研究热点之一。

研究表明，总生物碱是马钱子中最主要的有效部位，包括马钱子碱、士的宁、番木鳖次碱、马钱子新碱、番木鳖甙、依卡精等，其中马钱子中的主要生物碱成分中马钱子碱具有抗炎、镇痛作用，而其中士的宁是中枢神经兴奋剂，主要在临床上治疗面瘫，神经麻痹等，同时其为主要的毒性成分，基本无抗炎、镇痛作用；文献报道小鼠灌服士的宁、马钱子碱、马钱子仁的LD50分别为3.27mg/kg、233mg/kg和234.5mg/kg；小鼠腹腔注射上述药物的LD50分别为1.53mg/kg、69.77mg/kg和76mg/kg，其口服中毒剂量成人为5～10mg，口服致死量为30mg。表明士的宁是马钱子中的主要毒性成分。有文献报道，分别用士的宁和马钱子碱给小鼠灌胃，两者的LD50分别为3.27mg/kg和233mg/kg，由此可以得知士的宁的安全性很低，如果能除去马钱子总生物碱中的部分士的宁，则既能降低其毒性，又能保留其原有的抗炎镇痛的药理活性，提高临床用药的安全性。因此，现代研究中需要一种能降低士的宁含量的马钱子总碱的提取方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种安全、成本低、收率高、能降低士的宁含量的马钱子总生物碱的提取方法。

本发明是通过以下技术方案实现的：

(1)取马钱子，粉碎成粗粉，备用；

(2)将马钱子粗粉加酸液提取，合并提取液，过滤，得马钱子提取液，调整pH值至2-10，滤过；

(3)滤液上大孔吸附树脂柱吸附，先以去离子水洗脱，弃去洗脱液，再用酸液洗脱，弃去洗脱液，最后用乙醇/酸醇洗脱，收集乙醇/酸醇洗脱液；

(4)洗脱液减压浓缩，调节pH值至8-11，加入适量硅藻土，搅匀，蒸干，得固体物；

(5)固体物加有机溶剂提取，过滤，回收有机溶剂，减压干燥，粉碎，得药粉；

(6)药粉用甲醇处理，放冷至室温，过滤，滤液减压干燥，粉碎，即得马钱子总生物碱。

基于上述工艺过程，发明人又进行了进一步的研究，细化各步骤的参数，从而筛选出最优方案，具体内容如下：

步骤(1)中的马钱子是指制马钱子；

步骤(2)中的酸液是指1％-5％的盐酸、0.5％-2％的硫酸、盐酸乙醇溶液、硫酸乙醇溶液中的一种；

其中酸醇溶液优选50-80％ETOH·0.5-5％HCl，50-80％ETOH·0.5-2％H₂8O₄。

提取方法为渗漉法，回流法、搅拌法中的一种，优选加热回流法。

酸液用量为5-12倍量，加热回流次数为1-3次，每次0.5-2小时；

优选酸液酸液用量为10倍量，加热回流次数为2次，每次1.5小时；

提取液上柱前可调节pH2-10，优选调节pH6-7。

步骤(3)中树脂可选用AB-8、D101、732阳离子交换树脂，优选D101。

洗脱速度为1-3BV/h；优选2BV/h。

洗脱用去离子水用量为1-3倍柱体积；酸液用量为0.5-2倍柱体积；乙醇用量为2-6倍柱体积；

洗脱用酸液为1-5％盐酸或1-5％硫酸；优选3％盐酸。

洗脱用乙醇浓度为50-95％；优选50％乙醇

酸醇可用50-80％ETOH·1-10％HCl，50-80％ETOH·0.5-5％H2SO4。

步骤(4)中硅藻土的用量为1/20-1/5倍药材量；优选1/10倍药材量

步骤(5)中有机溶剂可选用氯仿、乙酸乙酯、丙酮等极性较小的有机溶剂，优选氯仿作为纯化溶剂。提取方式可选择搅拌、回流、超声等方法，优选回流提取。氯仿的用量为3-10倍量；加热回流1-3次，每次1-2小时；

步骤(6)中处理方法为搅拌、回流、超声，优选超声处理，甲醇的用量为1-5倍量。