[发明专利]一种寡聚透明质酸的制备方法及其用途

说明书

技术领域

本发明涉及一种寡聚透明质酸的制备方法及其用途，具体的，本发明涉及一种将大分子量透明质酸一步降解，得到寡聚透明质酸的方法，并涉及到制备的寡聚透明质酸的用途。

背景技术

透明质酸(Hyaluronic Acid，HA)，又名玻尿酸，是一种酸性粘多糖类高分子化合物，广泛存在于人和动物的结缔组织、眼球玻璃体、细胞间质、关节滑膜液、角膜及细菌壁中。

透明质酸是由D-葡萄糖醛酸及N-乙酰葡糖胺双糖单体重复排列而形成的直链多聚物。透明质酸直链链轴上单糖之间氢键的作用，分子在空间呈刚性的螺旋柱型；其半径为200nm，柱内侧因有大量羟基而产生强亲水性，溶液中HA亲和的水份约为其本身重量的1000倍，是国际公认最好的保湿剂之一。

透明质酸主要分为：医药级透明质酸、食用级透明质酸及化妆品级透明质酸等。目前透明质酸作为化妆品的添加成分被广泛使用。作为化妆品添加成分的透明质酸主要有以下作用：

(1)吸取水分

透明质酸能帮助肌肤汲取大量的水分，肌肤有了水分，自然就能保持弹性和柔软。在不久之前，我们还只能通过医学注射手段为肌肤补充透明质酸，而现在的类医学护肤品则可以将少量的透明质酸作为保湿剂，将百万分子量透明质酸压缩打包作用于肌肤，就能吸收约相当于自身重量1000倍的水，令表皮细胞再度充盈，抚平皱纹。见效时间虽比不上直接注射，但却可以每日不断补充，让细胞自然充盈起来。

(2)修复及保水

透明质酸可瞬间深层保湿、增加皮肤弹性与张力，有助恢复肌肤正常油水平衡，改善干燥及松弛皮肤。透明质酸也是肌肤中的一种重要成份，具有表皮组织修复的功能。当皮肤组织暴露在UVB射线下时，皮肤会晒伤、发炎，真皮组织会停止产生透明质酸，同时加快透明质酸的衰退率。透明质酸大量存在于人体的结缔组织及真皮层中，拥有强大的吸水能力和保湿功能，还能增强皮肤长时间的保水能力，能帮助弹力纤维以及胶原蛋白处在充满水分的环境中，让皮肤显的更有弹性。

透明质酸制备方法主要有动物提取法(如从脐带、活鸡冠中提取)和微生物发酵方法两种。这两种方法得到的透明质酸，平均分子量多数为几十到几百万，聚合度几千到几万。大分子透明质酸虽然有很好的吸水特性，但吸收水分后溶液粘度高。若作为化妆品，涂于皮肤上会形成一层膜，阻碍了皮肤的通透性。若作为食品或食品添加剂，由于粘度高，妨碍添加量，口感差，消化吸收性能差，美容功能难以实现。寡聚透明质酸较好的解决了以上问题。

研究表明，寡聚透明质酸具有以下突出作用：

(1)可刺激血管内皮细胞的增生和迁移，从而促进新生血管的生成，同时透明质酸低聚体可以促进内皮细胞合成I型和VIII型胶原，这两种胶原在血管形成过程中有重要作用；

(2)能够渗透到真皮层，保护肉芽组织免受氧自由基的破坏，并且能够促进伤口愈合；

(3)抗肿瘤作用；

(4)免疫调节作用；

(5)促进骨形成作用。

目前透明质酸降解的方法有：

物理方法：加热、机械剪切力、紫外线、超声波、60Co照射、γ-射线辐射等因素均可使HA发生降解。

化学方法：HA的化学降解方法有水解法和氧化降解法，水解法分酸水解和碱水解，氧化降解常用的氧化剂为次氯酸钠和过氧化氢。使用化学降解方法降解产物的相对分子质量可以通过改变酸碱或氧化剂的加入量和反应时间来控制，降解成本较低，易于大规模生产，但氧化降解可能会有氧化剂残留。

酶解方法：透明质酸酶、纤维素酶等。酶解法成本较高，不适于大规模的工业生产。

CN 101146830A公开了一种在丙酮等有机溶剂的含水酸性介质中降解得到透明质酸低聚体，工艺繁琐，有机溶剂容易残留。

CN 101020724A公开了一种低分子量透明质酸钠的制备方法，特别是一种从透明质酸发酵液中制备低分子量透明质酸钠的方法。其方法是透明质酸发酵液除去菌体，乙醇沉淀，溶解沉淀，透明质酸酶降解，使用膜组件制得低分子量透明质酸钠溶液，再次乙醇沉淀，洗涤沉淀，真空干燥得到成品。其方法还可以是将透明质酸发酵液用乙醇沉淀，溶解沉淀，滤去固形物，滤液用透明质酸酶降解，使用膜组件制得低分子量透明质酸钠溶液，再次乙醇沉淀，洗涤沉淀，真空干燥得到成品。本法制备的透明质酸钠其平均分子量可控制在8,000～20,000之间，最低可至5,000左右，而且分子量分布较窄，蛋白质含量不高于0.1％。该方法制备成本高，不适于大规模工业生产。