[发明专利]一种用于改善馒头品质的木聚糖酶的制备方法有效
| 申请号: | 201110291555.2 | 申请日: | 2011-09-30 |
| 公开(公告)号: | CN102399766A | 公开(公告)日: | 2012-04-04 |
| 发明(设计)人: | 李秀婷;朱运平;滕超;孙宝国;李娥 | 申请(专利权)人: | 北京工商大学 |
| 主分类号: | C12N9/42 | 分类号: | C12N9/42;C12R1/465 |
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| 地址: | 100048*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 用于 改善 馒头 品质 聚糖 制备 方法 | ||
1.能改善馒头品质的木聚糖酶的制备方法,其特征在于:
富含半纤维素的玉米芯,经稀碱处理后作为原料,以一株新型木聚糖酶产生菌株——娄彻氏链霉菌对该原料进行微生物发酵,制备高活力的木聚糖酶,该酶具有改善馒头品质的作用。
2.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于:
a.将收集到的富含腐败木质纤维材料的土样,置于以玉米芯木聚糖为唯一碳源的选择培养基上培养,采用透明圈法进行初筛,摇瓶发酵进行复筛,选出一株木聚糖酶活力较高的放线菌菌株;通过形态学特征、培养特征、生理生化特征和16S rDNA序列分析,确定这是一株新型的木聚糖酶产生菌——娄彻氏链霉菌L10904;
b.处理玉米芯原料:将无虫蛀、无霉变、干燥的玉米芯,经过10%稀碱处理,中和,离心,烘干后得到的材料,作为发酵的底物;
c.以娄彻氏链霉菌(Streptomyces rochei)L10904为产酶菌,培养基条件为(g/L):稀碱处理玉米芯粉,20;酵母浸膏,3;牛肉蛋白胨,10;NaNO3,2;KH2PO4,6;,MgSO4·7H2O,0.5,K2HPO4,1.5;pH6.0。接种量为约1.0cm2平板培养基上生长3~4d的菌丝体,液体发酵转速控制在140r/min,40℃培养6d,该培养液经离心得到的上清液即为木聚糖粗酶液;
d.对娄彻氏链霉菌L10904产生的木聚糖粗酶液进行提纯,得到电泳纯的木聚糖酶;通过20%-50%硫酸铵沉淀、CM Sepharose Fast Flow离子交换层析,经0~0.2mol/L NaCl洗脱所得到的样品,即为纯酶,经SDS-PAGE法测定,该木聚糖酶的分子量为22.5kDa。
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