[发明专利]神经酰胺和/或葡萄糖神经酰胺产生促进剂的制造方法

说明书

技术领域

本发明涉及利用特定微生物，以食品加工业等的副产物豆渣作为培养基的主原料，制造能够促进皮肤产生神经酰胺和/或葡萄糖神经酰胺的神经酰胺和/或葡萄糖神经酰胺产生促进剂的方法。

背景技术

神经鞘脂类之一的神经酰胺(Ceramide)存在于皮肤角质层中，占角质层中细胞间脂质的50％左右。神经鞘脂类(Sphingolipid)是具有鞘氨醇骨架的复合脂质的总称。葡萄糖神经酰胺(Glucosylceramide)是在神经酰胺上结合了葡萄糖而成的一种神经鞘脂类。由表皮细胞合成得到的神经酰胺暂时以葡萄糖神经酰胺或者神经鞘磷脂(Sphingomyelin)的形式被储存起来；之后被排出至细胞外，在葡糖脑苷酯酶(Glucocerebrosidase)和神经磷脂酶(Sphingomyelinase)的作用下，再次成为神经酰胺，从而发挥作为细胞间脂质的功能。

一直以来，已知神经酰胺、葡萄糖神经酰胺、半乳糖神经酰胺等神经鞘脂类具有促进角质层的保持水分能力、改善皮肤粗糙等效果(专利文献1～2)。虽然皮肤具有产生神经酰胺和葡萄糖神经酰胺的能力，但是这种能力并不充分，因而人们也尝试了从外部补充神经酰胺的方法。但是该方法的长期效果得不到认可，且存在稳定性低等问题。例如，报道了利用热带假丝酵母(Candida tropicalis)JPCCY0004株(NITEP-570)来制造葡萄糖神经酰胺的方法(专利文献3)。但是，该方法并不是关于神经酰胺和/或葡萄糖神经酰胺产生促进剂的方法，而只不过是将培养后的菌体中大量存在的葡萄糖神经酰胺直接提取的方法；而且，通过该方法合成得到的葡萄糖神经酰胺的神经酰胺骨架与人体中存在的神经酰胺类的神经酰胺骨架不同，其在两处具有碳碳双键且具有支链。因而，将这种葡萄糖神经酰胺涂布在人体皮肤上的话，有可能不能与人体皮肤相适应而产生使用安全性方面的问题。

而另一方面，如果能够增强或促进皮肤本身的神经酰胺或葡萄糖神经酰胺的产生能力，则无需从外部补充神经酰胺或葡萄糖神经酰胺，而能够通过促进皮肤自身产生神经酰胺或葡萄糖神经酰胺来提高皮肤的屏障功能和保湿功能。这样，由于是由皮肤自身产生神经酰胺或葡萄糖神经酰胺，因而其不存在与皮肤的适应性不好等安全性方面的问题。

因此，近年来，关于在皮肤角质层中以促进表皮神经酰胺产生为目的的物质的生产研究相当热门。作为促进神经酰胺产生的物质，已报道的有以灵芝、蜂花粉(Bee Pollen)、川芎等的提取物为有效成分的神经酰胺产生促进剂(专利文献4～6)。然而，由于这些神经酰胺产生促进剂全都是从植物原料提取得到，该提取操作耗费时间长，且由于天然资源的利用可能性有限等原因，其制造成本高。

另外，也报道了以含有烟酸和/或烟酰胺的乳酸菌培养物或者酵母菌培养物为有效成分的神经酰胺合成促进剂(专利文献7)。然而，从专利文献7的实施例可以看出，不含有烟酸和/或烟酰胺的乳酸菌培养物或者酵母菌培养物(比较例1～4)的神经酰胺产生量较之对照组并无明显变化，因而该神经酰胺合成促进剂实质上含有烟酸和/或烟酰胺作为有效成分，其神经酰胺合成促进效果还不够充分，尚有改善的余地。并且，由于使用烟酸或烟酰胺，因而其制造成本较高。

另外，已知德巴利酵母属(Debaryomyces)的微生物一般具有以下工业用途，例如，发酵葡萄糖生产D-阿拉伯糖醇、或者将木糖转化成木糖醇。

但是，目前还没有利用德巴利酵母属(Debaryomyces)的微生物来制造神经酰胺和/或葡萄糖神经酰胺产生促进剂的报道。

专利文献1：日本特开昭61-260008号公报

专利文献2：日本特开昭61-271205号公报

专利文献3：日本特开2005-194240号公报

专利文献4：日本特开2010-70499号公报

专利文献5：日本特开2010-150237号公报

专利文献6：日本特开平9-194383号公报

专利文献7：日本特开2010-22217号公报

发明内容

针对上述现有技术中存在的技术问题，本发明人进行了悉心研究，结果发现：在含有豆渣和糖类的培养基中培养德巴利酵母属(Debaryomyces)的微生物，特别是培养汉逊德巴利酵母(Debaryomyces hansenii)或范丽德巴利酵母(Debaryomycesvanrijiae)，能够低成本且高效地获得神经酰胺和/或葡萄糖神经酰胺产生促进剂，从而完成本发明。