[发明专利]一种利用优势降解菌处理制浆造纸废水的方法

权利要求书

1.一种利用优势降解菌处理制浆造纸废水的方法，其特征在于，包括如下步骤： 

（1）取1~2环土壤杆菌（Agrobacterium sp.），杆状菌（Bacillus sp.），肠杆菌（Enterobacter. Cloacae.），戈登氏菌（Gordonia sp.），恶臭假单胞菌（Pseudomonas putida.），施氏假单胞菌（Pseudomonas stutzeri.）分别接入营养培养基中，在30℃下培养36h后，取出，并用离心机在10000rpm速度下离心5min，取出沉淀并加入磷酸缓冲液洗涤后，再以同样条件离心一次，收集得到的六种菌体；

（2）将上述六种菌利用统计学分析方法筛选出4种对制浆造纸废水化学需氧量降解具有最优降解效果的优势菌株，分别为：土壤杆菌、杆状菌、戈登氏菌、恶臭假单胞菌；

（3）将上述筛选出的四种优势菌种接入培养基中，在30℃、150 r/min下振荡培养36 h，将包含菌体的培养液分别倒入离心管中，在5000r/min下离心10min，并用磷酸缓冲液洗涤2次，弃上清，取出沉淀用10 ml 无机盐溶液配成菌悬液，冷藏备用；

（4）将1.5g海藻酸钠加入装有50ml蒸馏水的三角瓶中，加热溶解，121℃条件下灭菌15min后，冷却至60℃，分别加入土壤杆菌菌悬液、杆状菌菌悬液、戈登氏菌菌悬液和恶臭假单胞菌菌悬液，然后将接入菌体的海藻酸钠溶液用注射器分别注入质量百分比为2%的氯化钙水溶液中，制备成2~3mm的固定化凝胶颗粒，然后放入冰箱中固化4h，用无菌水将固定化凝胶颗粒洗涤3次，分别制备土壤杆菌固定化颗粒、杆状菌固定化颗粒、戈登氏菌固定化颗粒和恶臭假单胞菌固定化颗粒；

（5）将上述制备的四种固定化凝胶化颗粒取出，按体积百分比计，分别取10～12%土壤杆菌固定化凝胶化颗粒、23～25%杆状菌固定化凝胶化颗粒、31～35%戈登氏菌固定化凝胶化颗粒和28～36%恶臭假单胞菌固定化凝胶化颗粒，总共20 ml，加入到含200 ml制浆造纸废水的锥瓶中，在30℃、150 r/min下振荡培养，检测其化学需氧量变化及色度变化情况。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中六种不同的细菌采用不同的营养培养基，其中土壤杆菌、杆状菌和肠杆菌的营养培养基为牛肉膏 3.0g/L，胰蛋白胨 5.0g/L；戈登氏菌营养培养基为葡萄糖 10.0g/L，酵母粉 10.0g/L；恶臭假单胞菌营养培养基为牛肉膏 1.5g/L，葡萄糖 1.0g/L，胰蛋白胨 6.0 g/L，酵母粉 3.0g/L；施氏假单胞菌的营养培养基为酪蛋白17.0g/L，磷酸氢钾 2.5 g/L，葡萄糖 2.5 g/L，大豆粉3.0 g/L，氯化钠5.0g/L。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述制浆造纸废水指由硫酸盐法竹浆洗浆废水及二氧化氯、螯合、过氧化氢三段漂白废水混合而成，其化学需氧量为1325 mg/L。