[发明专利]一种兼具SOD和GPx活性的65肽

权利要求书

1.一种具有抗氧化效应的含硒金属肽化合物，结构中含有Cu²⁺和Zn²⁺，同时含有被称为第21种氨基酸的硒代半胱氨酸(Sec)，其氨基酸序列为His-Gln-His-Gln-Phe-Gly-Asp-Leu-Ser-Gln-Gly-Ala-Glu-Ser-Thr-Gly-Pro-His-Tyr-Asn-Pro-Leu-Ala-Val-Pro-His-Pro-Gln-His-Pro-Gly-Asp-Trp-Gly-Asn-Phe-Ala-Val-Arg-Asp-Gly-Ser-Leu-Trp-Pro-Phe-Leu-Arg-His-Asn-Val-Tyr-Gly-Arg-Pro-Arg-Ala-Sec-Val-Val-His-Ala-Gly-Glu-Asp。

2.如权利要求1所述的具有抗氧化效应的含硒金属肽化合物，其特征在于：在正确位置安放了一些关键氨基酸残基，如His1、His3、His18、His26、His29、His61、Asp32和Asp65，这些氨基酸残基能够和Cu²⁺，Zn²⁺形成正确的和天然超氧化物歧化酶(SOD)相似的三维结构，具有SOD的活性。

3.如权利要求1所述的具有抗氧化效应的含硒金属肽化合物，其特征在于：具有以Sec作为催化残基的谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)的活性，在催化残基Sec58的附近引入了Gln2和Trp33，能够形成和天然GPx相似的催化三联体结构，而且其周围围绕了Phe5、Leu8、Phe36、Leu43、Trp44、Phe46、Leu47和Tyr52等一些输水氨基酸残基稳定催化三联体结构。

4.如权利要求1所述的具有抗氧化效应的含硒金属肽化合物，同时具有天然SOD的活性中心Cu²⁺和天然GPx的催化三联体结构，是一种兼具SOD和GPx活性的具有抗氧化协同效应的含硒65肽模拟物。

5.如权利要求1所述的具有抗氧化效应的含硒金属肽化合物，其特征在于：通过营养缺陷型表达将Cys58替换成Sec58掺入，替换前的氨基酸序列为His-Gln-His-Gln-Phe-Gly-Asp-Leu-Ser-Gln-Gly-Ala-Glu-Ser-Thr-Gly-Pro-His-Tyr-Asn-Pro-Leu-Ala-Val-Pro-His-Pro-Gln-His-Pro-Gly-Asp-Trp-Gly-Asn-Phe-Ala-Val-Arg-Asp-Gly-Ser-Leu-Trp-Pro-Phe-Leu-Arg-His-Asn-Val-Tyr-Gly-Arg-Pro-Arg-Ala-Cys-Val-Val-His-Ala-Gly-Glu-Asp。

6.如权利要求1所述的具有抗氧化效应的含硒金属肽化合物，其特征在于：通过PCR技术扩增出目的蛋白氨基酸编码的DNA片段，插入表达载体pPelB中并转化于Cys营养缺陷型表达菌株BL21(DE3)selB::kan cys51E中缺陷表达，再通过DEAE阴离子柱交换层析纯化。