[发明专利]用于激发特异性粘膜免疫反应的方法、疫苗组合和试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及免疫学领域，并具体涉及用于激发特异性粘膜免疫反应的方法、疫苗组合和试剂盒。

背景技术

大量的研究表明，HIV感染者很大一部分是通过粘膜组织如生殖道和直肠感染的^[1，2]。如果在病毒感染发生之前，预先防御性地建立免疫反应，不仅诱导产生有效地系统免疫应答，而且产生高效的粘膜免疫效应，有效发挥粘膜免疫第一道防线的作用，对于防止局部感染和消除最初感染细胞中的初始病毒的扩散、抑制病毒在体内的复制均具有十分重要的意义。粘膜免疫系统对病原体免疫反应的主要特征是分泌特异性免疫球蛋白A，即S-IgA。目前对仙台病毒、流感病毒、麻疹病毒及肠道轮状病毒的研究已经证明，IgA抗体具有下列几种抗病毒感染的机制：第一、在粘膜表皮细胞层外，即粘膜腔面(luminal)防止病毒的附着，实现免疫排斥(immune exclusion)，阻止病毒的侵入；第二、IgA在粘膜组织表皮细胞转运分泌过程中，在表皮细胞内中和已侵入的病毒(intracellular neutralization)，阻止病毒的复制；第三、在粘膜组织表皮细胞层内，即粘膜固有层(lamina propria)与病毒结合，然后将病毒清除出体外^[3，4，5]。与IgG介导的中和机制相比，IgA介导的保护反应可能更具广谱性。因此，近年来粘膜免疫效应和粘膜疫苗越来越受到关注和重视。

有研究者对HIV高危人群进行调查发现，粘膜部位高水平的IgA抗体与高危人群中HIV阴性者的保护成正相关^[6，7，8]。Wright等的体外试验也证明HIV特异性IgA单克隆抗体通过pIgR介导的方式，具有结合、中和并将HIV清除出体内的作用^[9]。然而，对HIV粘膜疫苗的研究进展却并不顺利，尽管sIgA是粘膜分泌物中最主要的抗体，但是常规的HIV疫苗经生殖道、直肠、或鼻腔免疫后很难诱导有效的粘膜sIgA抗体的产生^{[10，11，12]}。

发明内容

本发明基于如下发现，通过优化疫苗及疫苗的免疫策略，能够显著提高疫苗(包括HIV疫苗)接种所激发的特异性粘膜免疫反应，产生高滴度的粘膜sIgA。

在第一方面，本发明提供一种激发个体产生针对病原体的特异性粘膜免疫反应的方法，其步骤包括：

(a)给所述个体全身施用表达来自所述病原体的抗原的复制型重组痘苗病毒；和

(b)给所述个体粘膜施用一或多次包含所述抗原的疫苗组合物。

在本发明的方法中，所述复制型重组痘苗病毒包含编码来自所述病原体的抗原的多核苷酸。

在本发明的方法中，步骤(a)中通过选自肌肉注射、皮下注射、静脉注射和腹腔注射的途径施用所述复制型重组痘苗病毒。

在本发明的方法中，步骤(b)中通过选自滴鼻、舌下、阴道和直肠施用的途径施用所述疫苗组合物。

在本发明的方法中，给所述个体粘膜施用3次所述疫苗组合物。

在本发明的方法中，所述复制型重组痘苗病毒源自痘苗病毒天坛株。

在本发明的方法中，所述疫苗组合物还包含佐剂。

在本发明的方法中，所述病原体是病毒，例如反转录病毒科病毒，尤其是慢病毒亚科病毒，或例如正粘病毒科病毒。在本发明的方法中，所述病毒优选是各型HIV病毒或流感病毒或它们的各种亚型。

在本发明的方法中，所述抗原是包膜蛋白，例如HIV病毒的包膜蛋白，例如所述包膜蛋白是gp140。

在第二方面，本发明提供用于激发个体产生针对病原体的特异性粘膜免疫反应的疫苗组合或试剂盒，其包括：

(a)用于给所述个体全身施用的表达来自所述病原体的抗原的复制型重组痘苗病毒；和

(b)用于给所述个体粘膜施用一或多次的包含所述抗原的疫苗组合物。

在本发明的疫苗组合或试剂盒中，所述复制型重组痘苗病毒包含编码来自所述病原体的抗原的多核苷酸。

在本发明的疫苗组合或试剂盒中，(a)中所述复制型重组痘苗病毒用于通过选自肌肉注射、皮下注射、静脉注射和腹腔注射的途径施用。

在本发明的疫苗组合或试剂盒中，(b)中所述疫苗组合物用于通过选自滴鼻、舌下、阴道和直肠施用的途径施用。

在本发明的疫苗组合或试剂盒中，所述疫苗组合物用于给所述个体粘膜施用3次。

在本发明的疫苗组合或试剂盒中，所述复制型重组痘苗病毒源自痘苗病毒天坛株。

在本发明的疫苗组合或试剂盒中，所述疫苗组合物还包含佐剂。