[发明专利]富硒北冬虫夏草母种培育法

权利要求书

1.富硒北冬虫夏草母种培育法，特征是包括如下步骤：第一步、试管斜面富硒菌种的培养；第二步、富硒北冬虫夏草液体菌种的培养；第三步、富硒北冬虫夏草的培育。

2.根据权利要求1所述的富硒北冬虫夏草母种培育法，其特征是所述的试管斜面富硒菌种的培养包括：1、培养基成份：马铃薯200克，葡萄糖10-30克，蛋白陈10-20克，琼脂15-30克，磷酸二氢钾卜3克，含硒量2000mg/kg的硒酵母10-50克；配制方法：称取洗净去皮马铃薯簿片200克，加入1000毫升煮沸20分钟，过滤，取马铃薯汁放入1000毫升烧杯中，加入葡萄糖20克，琼脂20克，蛋白陈10克，磷酸二氢钾05克，硒酵母15克，水浴加热至琼脂完全溶化，加水补足1000毫升，分装在伞20～200m.rn试管内，每支试管装12毫升，用棉塞塞紧，在高压灭菌锅120℃保持灭菌40分钟，出锅后趁热将试管摆成培养基离棉塞5-6cm的斜面，冷却后斜面成固体状备用；2、菌种分离、接斜面菌种：选生长粗壮圆形、色泽桔红的野生北冬虫夏草子实体或人工培育的北冬虫夏草子实体，用75％酒精灭菌1分钟，用灭菌水洗去酒精，在接种箱中将子实体切成2mm簿片接入试管培养基中间，切口向上，在20℃恒温箱中培养15天取出见光，散射光照3天转色，选出菌丝生长平整，色泽桔红，无杂菌的富硒北冬虫夏草母种，放入5℃恒温箱内保存备用。

3.根据权利要求1所述的富硒北冬虫夏草母种培育法，其特征是富硒北冬虫夏草液体菌种的培养包括：营养液的配方：葡萄糖20克，蛋白陈10克，磷酸二氢钾1克，硫酸镁1克，硒酵母15克，水1000毫升；操作方法：称取配方所列的原料放入1000毫升水中煮沸10分钟，冷却至室温后用多层纱布过滤，将清液装入500毫升盐水瓶中，每瓶装250毫升，用棉塞塞紧，放入高压灭菌锅，120℃保持灭菌30分钟，冷却至室温后连同母种放入接种箱中，用接种刀切母种一片约0.5平方厘米接入浮在液面上，放入暗室，控制温度20-22℃静置培养3天，母种长出白色菌丝，放在摇床中5天即成富硒北冬虫夏草液体菌种。

4.根据权利要求1所述的富硒北冬虫夏草母种培育法，其特征是富硒北冬虫夏草的培育包括：1、固体培养基营养液的配制：称取葡萄糖20克，蛋白陈10克，磷酸二氢钾1克，硫酸镁1克，维生素B，100毫克，硒蛋白35克，放入1000毫升70-80℃热水中，搅拌至物料溶解；2、固体培养基的配制：在600毫升大口玻璃瓶中，每瓶装入大米40克，营养液60毫升，用聚丙烯簿膜封瓶口，放入高压灭锅内，在120℃温度下保持灭菌60分钟，缓慢排放压力后出锅，冷却待用；3、接种、培育：在超净台上用带喷咀的接种枪每瓶接入富硒北冬虫夏草液体菌种3毫升，移入暗室控制温度20-22℃发菌，经过8天避光发菌，培养基表面全部长满白色菌丝即可见光，在散射光照下3-5天菌丝转为桔黄至桔红色，控制温度20-22℃，相对湿度80-85％，10一天出现子实体原基，再经30一天的生长，子实体长到4-8厘米，形成孢子时子实体成熟即可采收，及时干燥至水份不超过5％，用塑料袋密封包装。