[发明专利]一种高纯度表没食子儿茶素的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于天然产物化学的技术领域，具体涉及一种从粗品茶多酚中制备高含量表没食子儿茶素的方法。

背景技术

茶多酚是一种从绿茶中提取的多酚类成分，是茶叶中的主要活性成分。主要由没食子儿茶素没食子酸酯(Epigallocatechin-3-gallate，EGCG)、表儿茶素没食子酸酯(Epicatechin-3-gallate，ECG)、表没食子儿茶素(Epigallocatechin，EGC)和表儿茶素(Epicatechin，EC)等组成。小叶种绿茶中EGCG和EGC含量较高，分别占4％和1％左右。

不同的茶儿茶素单体的生理活性存在一定差异，EGCG对于预防和治疗恶性肿瘤、高血脂症肥胖症、神经退行性疾病等有良好作用；ECG具有良好的抗菌作用；EGC能刺激骨骼形成，帮助减缓骨骼老化。茶多酚中EGCG和ECG属于酯型儿茶素，苦涩味较重，而EGC和EC属于游离型儿茶素，味爽口不苦涩，这对于开发功能型茶饮料尤为重要。

目前文献报道或专利公开的EGCG制备技术较多，但EGC的制备技术相对较少。主要包括制备型高效液相色谱法和高速逆流色谱法制备分离，属于实验室分离范畴，制备量通常只有数毫克，无法进行工业化生产。  公开号为CN101134941和CN101113411的专利介绍了一种诱导制备EGCG酯酶及用该酶生产EGC和没食子酸的方法。该方法EGC转化率和得率较高，适用于工业化大规模生产，但以米曲霉EGCG水解制备EGC的方法，水解后的EGC和没食子酸还要进行进一步分离，制备成本较高。

发明内容

针对以上现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种从粗品茶多酚中提取纯化出高含量EGC的方法。其核心技术是采用茶多酚为原料，经溶解、大孔吸附树脂进行吸附、低浓度的脂肪醇洗脱、浓缩洗脱液、结晶、冷冻干燥，从而获得高含量EGC，含量经高效液相色谱检测可达到92-95％。

本发明目的通过以下技术方案实现：

1.取一定含量的茶多酚粗品，加适量纯净水作溶剂进行加热提取，提取液过滤，残渣弃去；

2.将溶解后的茶多酚溶液通过装有非极性大孔吸附树脂的层析柱；

3.用纯净水冲洗树脂；

4.用低浓度的脂肪醇洗脱树脂，当流出液有颜色变化时，开始收集流出液；

5.浓缩洗脱液，至浓缩液达到5-30％；

6.浓缩液在4℃的条件下放置24h，结晶；

7.将晶体用少量纯净水冲洗，过滤后采用冷冻干燥的方法进行干燥，得到粉末状的EGC。

在一个实施方案中，步骤1中为茶多酚粗品为经乙酸乙酯萃取或聚酰胺树脂进行吸附分离所获得的小叶种绿茶提取物，所述纯净水体积为茶多酚粗品的1-20倍量(M∶V)，优选2-15倍，最优10倍。

在一个实施方案中，步骤2中为大孔吸附树脂，优选美国罗门哈斯的Amberlite XAD-2、日本三菱公司的HP-20和我国D101与AB-8。

在另一个实施方案中，步骤4中脂肪醇为C₁-C₃伯醇和仲醇，优选甲醇和乙醇。所述脂肪醇浓度为5-15％。所述脂肪醇洗脱体积为1-10倍柱体积，优选2-5倍柱体积，最优3倍柱体积。

技术效果：

1.采用柱层析分离技术，大大简化了目前报道的各种工艺，操作简单方便，同时生产成本低，利于工业化生产。

2.按照本发明提供的生产工艺生产出来的EGC含量经高效液相色谱检测可达到92-95％，可以满足现代功能食品、保健品等领域的市场需求，具有很好的市场优势。

附图说明

图1粗品茶多酚高效液相色谱图

图2经纯化后样品中EGC高效液相色谱图

具体实施方式

下面，本发明将用实施例进行进一步的说明，但是它并不限于这些实施例的任一个或类似实例。

实施例1