[发明专利]一种碘普罗胺高效降解菌的提取方法无效
申请号: | 201110276469.4 | 申请日: | 2011-09-16 |
公开(公告)号: | CN102329748A | 公开(公告)日: | 2012-01-25 |
发明(设计)人: | 刘亚男;刘凯英;薛罡;刘振鸿;石为民;杨琦;吴瑶;冯菲;李姗珊;杨萍;刘琼 | 申请(专利权)人: | 东华大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;A62D3/02;C12R1/38;A62D101/28 |
代理公司: | 上海泰能知识产权代理事务所 31233 | 代理人: | 黄志达;谢文凯 |
地址: | 201620 上海市*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 普罗 高效 降解 提取 方法 | ||
1.一种碘普罗胺高效降解菌(Pseudomonas sp)I-24的提取方法,包括:
将城市污水处理厂二沉池的回流污泥经定向驯化培养,然后将驯化培养后的样品通过富集分离和纯化,即得该碘普罗胺高效降解菌。
2.根据权利要求1所述的一种碘普罗胺高效降解菌的提取方法,其特征在于:所述的定向驯化培养为将活性污泥按5%的接入量接种于无机盐培养基中,以梯度压力式驯化法驯化;其中碘普罗胺浓度为10mg/L、50mg/L、80mg/L、100mg/L、130mg/L、150mg/L,150mL锥形瓶中装填量100mL,在30℃、160r/min的摇床中避光振荡培养,总驯化时间为2个月。
3.根据权利要求2所述的一种碘普罗胺高效降解菌的提取方法,其特征在于:所述的无机盐培养基为NH4Cl 2.1g,K2HPO4 4.35g,KH2PO4 1.7g,MgSO4 0.2g,CaCl2·2H2O 0.03g,MnSO4 0.05g,FeSO4·7H2O 0.01g,蒸馏水1000mL,pH=6.8~7.0。
4.根据权利要求1所述的一种碘普罗胺高效降解菌的提取方法,其特征在于:所述的富集分离和纯化为将驯化培养后的样品静置30分钟,取上层水样1mL作10-1~10-10梯度稀释,然后将每种稀释浓度分别取1mL菌液涂布于固体培养基中,并将其倒置于30℃培养箱中培养48h;挑取形态清晰的单一菌落,编号,在固体培养基上划线,将培养皿倒置于30℃培养箱中培养48h,再观察结果;反复几次,并在电子显微镜下观察,确保是纯的单一菌株后,将分离出的菌种接种到斜面培养基上,4℃下保存于冰箱中。
5.根据权利要求4所述的一种碘普罗胺高效降解菌的提取方法,其特征在于:所述的固体培养基为牛肉膏3.0g,蛋白胨10.0g,NaCl 5.0g,琼脂粉18g,蒸馏水1000mL,pH=7.0~7.2。
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