[发明专利]一种脱氧野尻霉素提取方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物提取技术，特别涉及一种脱氧野尻霉素单体的提取方法。

背景技术

1—脱氧野尻霉素(1—deoxynojirimycin, DNJ)为一种极性含N化合物,其化学名称是3, 4, 5—三羟基—2—羟甲基四氢吡啶, 分子式为 C₆H₁₃NO₄，相对分子质量为163。DNJ具有很强的抑制α—葡萄糖苷酶的作用,是降血糖、治疗糖尿病的有效成分^[1～4], 此外还具有抗病毒^[5]、抗肿瘤转移^[6]等药理作用。近年来,国内外学者对DNJ的来源、在生物体内的合成机制及化学合成方法进行了大量的研究探索,希望找到一种稳定、高效、经济的获取DNJ的途径^[7]。

李宇亮^[8]等报道了从桑叶中提取脱氧野尻霉素的方法，主要包括提取，提取物过阳离子交换树脂，正丁醇萃取等步骤，得到脱氧野尻霉素纯品。该工艺需要用正丁醇萃取；正丁醇较贵，生产成本较高。

刘韦鋆^[9]等报道了一种从桑叶中提取脱氧野尻霉素的方法，包括桑叶加70%乙醇提取,将提取液浓缩后通过大孔吸附树脂,通过大孔吸附树脂的流出液,浓缩,通过阳离子交换树脂,用蒸馏水洗,用0.5mol/L氨水洗脱,收集洗脱液,浓缩,浓缩液通过硅胶纯化,将有杂质的组分弃去,合并含1-脱氧野尻霉素较纯的组分,浓缩,真空干燥,即得1-脱氧野尻霉素(DNJ)。该工艺需要乙醇提取，在上阳离子交换素质之前需要通过大孔树脂，并4次浓缩；工艺能耗高，使用乙醇成本也高。

周惠燕^[10]等报道了利用反向柱层析技术提取纯化脱氧野尻霉素的方法，脱氧野尻霉素的含量达到10.7%；该技术未能得到纯品。

刘树兴^[11]等以DXA-6 树脂装柱、pH10、原液浓度 0.352 mg/mL、流速 2.0 BV/h 条件下吸附，80%乙醇溶液以 2.5 BV/h 的流速洗脱，提取脱氧野尻霉素。提取工艺需要使用乙醇，而且并未明确最终产物的纯度。

中国专利技术（03101988.9）报道了一种含有桑叶总碱浸膏的制剂及其制备方法：桑叶用水或者亲水溶剂提取，絮凝，上清液离子交换，亲水性溶剂回流提取，浓缩至干得到浸膏。产品的纯度达到50%以上，该制剂具有明显的降血糖及改善糖耐量作用。该方法需要絮凝；被树脂吸附的物资需要用亲水溶剂回流洗脱下来，实际操作中有些不便。

中国专利技术（02113004.3）报道了桑枝提取物及其提取方法和新用途：桑枝提取物由单味药材桑枝用0～95％乙醇水溶液或氯仿、丙酮、乙酸乙酯、甲醇等溶剂或它们的组合在10－100℃温度条件下提取1次或1次以上，合并提取液，回收溶剂即得；或用下列方法进一步纯化：提取液调pH为7.5－9.5，离心后上清液调pH为4－6，沉淀水洗至中性，干燥即得；提取液经石油醚或汽油脱脂而得；提取液经石油醚或汽油脱脂后，用氯仿、乙酸乙酯、丙酮、甲醇或水分别或依次提取而得；提取液经大孔吸附树脂吸附后，用10－95％乙醇水溶液解吸附而得；提取液经硅藻土、氧化铝等吸附后，用氯仿、乙酸乙酯、丙酮、甲醇、乙醇等溶剂洗脱后，浓缩干燥而得；提取液经聚酰胺、硅胶或离子交换树脂等柱层析分离。以上纯化方法可单用或采用几种方法的组合。所得的桑枝提取物中含有大量黄酮类成分，包括芦丁、槲皮素、桑色素等。该专利技术未明确提取物含DNJ的纯度，而且纯化时石油醚脱脂、大孔树脂吸附等，操作程序复杂。

中国专利技术（200710060127.2）报道了从桑叶中连续提取生物碱、黄酮和多糖活性成分的方法：选用溶剂为20％～90％的乙醇或10％～90％的丙酮回流提取，得到滤液和滤渣；滤液浓缩、加水溶解后，通过大孔树脂分离得含量为30％～50％的黄酮类化合物；经过大孔树脂后的溶液，再通过离子交换树脂分离得含量为40％～60％的生物碱类化合物；桑叶滤渣，用水煎煮并脱色，10％～60％醇沉，得含量为55％～85％的酸性多糖类化合物。该技术需要大量的乙醇或者丙酮进行提取，工艺技术成本高，能耗高，未得DNJ纯品。