[发明专利]皂苷化合物及其制备方法与在制备免疫佐剂中的应用

权利要求书

1.一种皂苷化合物，其特征在于，所述化合物包括金铁锁皂苷B和金铁锁皂苷C，以下列结构式表示：

金铁锁皂苷B

金铁锁皂苷C

                                                。

2.一种如权利要求1所述皂苷化合物的制备方法，其特征在于，该方法包括下列步骤：

(1)金铁锁干燥根，粉碎后80％乙醇加热回流提取三次，合并提取液，减压浓缩得浸膏无醇味，浸膏kg用纯水L按1∶10的比例稀释后，过大孔树脂柱HP-20，分别用纯水，70％乙醇，丙酮依次洗脱；取70％乙醇洗脱部位为总皂苷，该总皂苷部位过C-18反相键合硅胶柱划段，用纯水，30％乙醇，70％乙醇，90％乙醇依次洗脱，共分为四个洗脱部分S1-S4；取S4段过硅胶柱，以甲醇-乙酸乙酯1∶1洗脱分为3部分S6-1，S6-2和S6-3，按照薄层板上斑点的Rf值对斑点依次收集划断，薄层板色谱展开剂为甲醇-乙酸乙酯1∶1体积比，20％硫酸显色显色剂；取S6-2部分经过C-18反相键合硅胶柱，依次用40％，60％，80％和纯甲醇洗脱，得到4个洗脱部分S6-2-a，S6-2-b，S6-2-c和S6-2-d，按照薄层板上斑点的Rf值依次收集划断，薄层板色谱展开剂为甲醇∶水1∶1体积比，20％硫酸显色显色剂；取S6-2-c过凝胶柱，用甲醇作流动相洗脱，最后分离到1个化合物金铁锁皂苷A，其化学结构以下式表示：：

金铁锁皂苷A

上式中：Glc：D-葡萄糖

        Gal：D-半乳糖

        Xyl：D-木糖

        Fuc：夫糖

        Rha：鼠李糖                                     ；

(2)制备金铁锁皂苷B和金铁锁皂苷C：

i、NaOH水解金铁锁皂苷A中葡萄糖醛酸上羧基所连的正丁醇链：向Cp0的THF溶液中加入NaOH溶液，在室温条件下搅拌过夜，然后，混合物用酸性树脂Dowex Resin H⁺form中和后过滤，滤液蒸干后过Sephadex LH-20柱，用甲醇洗脱，得到水解产物TS1：

ii、葡萄糖醛酸的羧基上接上不同的脂肪胺链或醚链：分别向上述步骤i水解产物TS1的DMF溶液中加入正己胺和1-氨基四甘醇单甲醚，于1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐，HOBt和DIEA中，在室温条件下反应搅拌过夜，然后减压浓缩至干，两个反应产物分别过C-18反相键合硅胶柱ODS，各用40％，50％和60％的甲醇溶液梯度洗脱得到金铁锁皂苷B和金铁锁皂苷C：

3.一种如权利要求1所述皂苷化合物在制备免疫佐剂中的应用。

4.根据权利要求3所述应用，其特征在于，所述皂苷化合物为金铁锁皂苷B或金铁锁皂苷C。

5.根据权利要求3所述应用，其特征在于，所述免疫佐剂是由金铁锁皂苷B作为活性成分与药用载体组成的药物组合物。

6.根据权利要求3所述应用，其特征在于，所述免疫佐剂是由或金铁锁皂苷C作为活性成分与药用载体组成的药物组合物。

7.根据权利要求3所述应用，其特征在于，所述免疫佐剂中，皂苷化合物的量为5μg-1000μg/单剂量。

8.根据权利要求7所述应用，其特征在于，所述免疫佐剂中，皂苷化合物的量为10-50μg/单剂量。