[发明专利]一种利用介孔二氧化硅纳米颗粒装载siRNA的方法有效
| 申请号: | 201110266192.7 | 申请日: | 2011-09-08 |
| 公开(公告)号: | CN102327622A | 公开(公告)日: | 2012-01-25 |
| 发明(设计)人: | 古宏晨;李旭 | 申请(专利权)人: | 上海交通大学 |
| 主分类号: | A61K48/00 | 分类号: | A61K48/00;A61K47/04;A61K47/32;A61K47/34;A61K47/36 |
| 代理公司: | 上海旭诚知识产权代理有限公司 31220 | 代理人: | 郑立 |
| 地址: | 200240 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 利用 二氧化硅 纳米 颗粒 装载 sirna 方法 | ||
1.一种利用介孔二氧化硅纳米颗粒装载siRNA的方法,其特征在于:向含有介孔二氧化硅纳米颗粒的弱极性溶剂中分别加入高盐溶液与siRNA的水溶液,实现介孔二氧化硅纳米颗粒对siRNA的吸附;再通过正电性高分子包覆颗粒,阻止siRNA在生理溶液环境中的释放,由此实现介孔二氧化硅纳米颗粒对siRNA的装载。
2.根据权利要求1所述的利用介孔二氧化硅纳米颗粒装载siRNA的方法,其特征在于:所述介孔二氧化硅纳米颗粒的粒径为30~1000纳米,颗粒的介孔孔径为2~10纳米。
3.根据权利要求1或2所述的利用介孔二氧化硅纳米颗粒装载siRNA的方法,其特征在于:所述的介孔二氧化硅纳米颗粒为单一的介孔二氧化硅成分或内核为无机非金属氧化物成分或金属成分而外壳为介孔二氧化硅成分具有核壳结构的颗粒材料,其中所述的无机非金属氧化物成分包括四氧化三铁、氧化锰和氧化锌中的一种或多种,所述的金属成分包括金、银、铜和镍中的一种或多种。
4.根据权利要求1或2所述的利用介孔二氧化硅纳米颗粒装载siRNA的方法,其特征在于:所述的弱极性溶剂为纯的有机溶剂,包括甲醇、乙醇、异丙醇和丙酮中的一种或多种。
5.根据权利要求1或2所述的利用介孔二氧化硅纳米颗粒装载siRNA的方法,其特征在于:所述高盐溶液包括以下组分:盐酸胍、异硫氰酸胍和高氯酸钠中的一种或其混合物,其最终浓度为1~6摩尔每升;甲醇、乙醇、异丙醇和丙酮中的一种或其混合物,其最终溶液体积分数为10~50%;去离子水、双蒸水和灭菌水中的一种,其最终溶液体积分数为50%~90%。
6.根据权利要求1或2所述的利用介孔二氧化硅纳米颗粒装载siRNA的方法,其特征在于:siRNA需要先在去离子水、双蒸水或灭菌水中溶解成为溶液,其溶液浓度为0.25~2.5mg/mL。
7.根据权利要求1或2所述的利用介孔二氧化硅纳米颗粒装载siRNA的方法,其特征在于:所述介孔二氧化硅材料对siRNA的吸附,其条件为:温度范围为0~40℃;持续时间为1h~24h;混合溶液的各组分,包括弱极性溶液、高盐溶液、siRNA溶液的体积分数可在如下范围内:2~8∶0.5~1.5∶1变化。
8.根据权利要求1或2所述的利用介孔二氧化硅纳米颗粒装载siRNA的方法,其特征在于:所述的用正电性高分子材料包覆,阻止siRNA在生理溶液环境中的释放,其中正电性高分子材料包括聚乙烯亚胺、聚赖氨酸、壳聚糖和超支化聚乙烯氨胺中的一种或多种。
9.根据权利要求8所述的利用介孔二氧化硅纳米颗粒装载siRNA的方法,其特征在于:所述的正电性高分子的分子量范围为800Da~50kDa。
10.根据权利要求8所述的利用介孔二氧化硅纳米颗粒装载siRNA的方法,其特征在于:正电性高分子包覆后的颗粒需要重新分散到去离子水中,并在超声下处理,用于除去颗粒表面游离的正电性高分子,减轻颗粒的团聚。
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