[发明专利]一种制备古登堡菊素的方法

说明书

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种制备古登堡菊素的方法。

背景技术

倍半萜内酯类化合物是一大类药用植物的重要生物活性成分，广泛存在于爵床科、伞形科、大戟科、木兰科、防己科、尤其是菊科植物中，仅从菊科植物中分离到的倍半萜内酯就超过3000种，这类一般带有苦味的天然产物对大范围的动植物具有多种生物生理活性，如抗肿瘤、抗溃疡、强心、神经毒性、细胞毒性、微生物生长抑制（如抗菌消炎，防治血吸虫病等）和植物生长抑制作用（即植物毒素）、皮肤致敏作用，昆虫拒食作用，以及人类异构酶抑制活性。桉烷内酯是相当重要的一类倍半萜内酯，迄今为止已经报道的桉烷内酯类天然产物超过500种，常见的桉烷内酯主要有两类，12，6-桉烷内酯及12，8-桉烷内酯。

古登堡菊素（Gutenbergin），分子量为C₁₇H₁₈O₅，分子量为302.33。是从菊科植物心叶古登堡菊Gutenbergia cordifolia Benth.ex Oliver叶中提取分离得到的一种12，6-桉烷内酯类化合物。现代研究表明，古登堡菊素具有抗菌作用和细胞毒作用。高章华等在文献“桉烷内酯类倍半萜的全合成及紫杉醇A环片断合成新方法”中，以α-山道年为原料，合成各种倍半萜内酯及倍半萜类天然产物或者天然产物骨架的合成，该方法步骤多，副产物多，不易分离。目前尚未发现从天然植物中提取分离高纯度古登堡菊素的研究报道。

发明内容

本发明的主要目的在于提供一种制备古登堡菊素的方法。该方法制备量大、样品损失少、产品纯度高，易于规模化。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种制备古登堡菊素的方法，其特征在于包括以下步骤：将心叶古登堡菊叶粉碎，用10-20倍丙酮溶液超声提取2-3次，每次30-180分钟，合并提取液加硅藻土加热搅拌过滤，滤液浓缩得到浸膏，用相当于浸膏2-5倍量的乙醚萃取浸膏2-4次，收集合并萃取液，浓缩至原体积的1/10-1/15，得到乙醚萃取物，采用高速逆流色谱法对所得乙醚萃取物进行分离纯化，根据检测器谱图接收目标流分，并用制备液相色谱对流分进一步纯化，得到古登堡菊素。

所述硅藻土用量为总提取液量的1-3%。

所述高速逆流色谱法对乙醚萃取物进行分离纯化，所用溶剂系统为石油醚-甲醇-水，体积比为（4-6）:（6-10）:（3-4）。

所述制备液相色谱分离条件为：色谱柱的规格为10mm×250mm，流动相为甲醇-水（90:10），流速为2-4ml/min，检测波长为238nm。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步说明。

实施例1：

将心叶古登堡菊叶500g粉碎，用10L丙酮溶液超声提取2次，每次30分钟，合并两次提取液，加180g硅藻土加热充分搅拌后，过滤，滤液旋转蒸发浓缩得到浸膏，用相当于浸膏3倍量的乙醚萃取3次，收集、合并乙醚萃取液于60℃条件下减压蒸馏浓缩至原体积的1/12，得到乙醚萃取物。将体积比6:10:3.5的石油醚-甲醇-水混合，振荡摇匀，使两相达到平衡，静置分层后分离，下相为流动相，上相为固定相，分别对其超声脱气40min后冷却备用；取乙醚萃取物溶解于等体积的上相和下相溶剂中，过滤，得样品溶液；将配制好的固定相以5ml/min的流速充满高速逆流色谱仪的螺旋管中，开启制备型高速逆流色谱仪，调整主机转速为820rpm，以2ml/min的流速将流动相泵入柱内，待柱内溶剂体系建立动态平衡后，取样品溶液由进样阀进样，然后根据紫外检测谱图收集古登堡菊素流分，减压浓缩后再应用高效液相色谱分离纯化，色谱条件为：流动相：甲醇-水（90:10）；流速2.5ml/min；柱规格：10mm×250mm；检测波长238nm，根据检测器谱图收集目标成分，减压浓缩得到纯度98.8%的古登堡菊素。

实施例2：