[发明专利]一种内折香茶菜乙素的制备工艺

说明书

技术领域

本发明属于天然药物提取技术领域，涉及一种内折香茶菜乙素的制备工艺。

背景技术

内折香茶菜乙素（Inflexnsin B），分子式：C₂₀H₂₆O₅，分子量：346.42，CAS号：18226-57-5，是一种螺断贝壳杉烯二萜类化合物，为无色棱晶，mp.221-223℃。现代药理研究表明，内折香茶菜乙素具有较强的抗肿瘤作用，对体外和体内的艾氏腹水癌（Ehrlich ascites carcinoma，ECA）肿瘤细胞有明显的抑制作用，对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌和白色念珠菌有很强的抑菌作用。内折香茶菜乙素来源于唇形科（Labiatae）内折香茶菜Rabdosia inflexus(Thunb.)Hara，为多年生草本、灌木或半灌木，广泛分布于河南、江苏、四川、安徽、山东等地，粤东地区具有丰富的资源，内含的内折香茶菜乙素具有较好的临床应用价值，可作为一种有前途的抗肿瘤药物，值得进一步深入研究与开发。

现有文献中，尚无大量内折香茶菜乙素的制备工艺报道。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种大量制备高纯度内折香茶菜乙素的工艺。

为了解决上述技术问题，本发明采用下列技术方案：

以内折香茶菜为原料，粉碎至20-60目，加入萃取釜中，采用超临界CO₂萃取，以95%乙醇作为夹带剂，收集萃取物，继以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水为溶剂系统，采用高速逆流色谱仪分离，收集流分减压浓缩，冷冻干燥即得内折香茶菜乙素。

所述超临界CO₂萃取条件为：萃取温度为50-65℃，萃取压力为20-30MPa，分离釜温度为50-55℃，压力为4-8MPa，超临界CO₂流量与夹带剂乙醇流量比为95:5-80:20。

所述溶剂系统体积比为（4-7）：（2-3）：（4-7）：（2-3）。

本发明方法制备内折香茶菜乙素，具有提取时间短，提取率高，能耗低，绿色环保，且所用试剂可重复使用，制备量大，产品无损失，纯度高等优点。

下面将结合具体实施方式对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式

实施例1：

以内折香茶菜为原料，粉碎，取1kg加入5L的超临界二氧化碳萃取釜中，超临界CO₂萃取条件为：萃取温度60℃，萃取压力25MPa，超临界CO₂流量为20L/h，加入夹带剂95%乙醇，超临界CO₂流量与夹带剂流量比为95:5。分离釜温度为50℃，压力为7MPa，收集分离釜分离出的萃取液，减压浓缩至无醇，得内折香茶菜乙素粗品。以体积比7:3:7:3的正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水为溶剂系统，将其充分混合后静置分相，取上相为固定相，下相为流动相，开启高速逆流色谱仪，取下相溶解粗品，注入色谱仪，调节转速为850rpm，流速2ml/min，收集内折香茶菜乙素流分，减压浓缩，冷冻干燥得内折香茶菜乙素129mg，经HPLC检测，其含量为98.8%。

实施例2：

以内折香茶菜为原料，粉碎至60目，取1kg加入5L的超临界二氧化碳萃取釜中，超临界CO₂萃取条件为：萃取温度55℃，萃取压力22MPa，超临界CO₂流量为20L/h，加入夹带剂95%乙醇，超临界CO₂流量与夹带剂流量比为87:13。分离釜温度为53℃，压力为4MPa，收集分离釜分离出的萃取液，减压浓缩至无醇，得内折香茶菜乙素粗品。以体积比6:2:4:3的正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水为溶剂系统，将其充分混合后静置分相，取上相为固定相，下相为流动相，开启高速逆流色谱仪，取下相溶解粗品，注入色谱仪，调节转速为850rpm，流速2ml/min，收集内折香茶菜乙素流分，减压浓缩，冷冻干燥得内折香茶菜乙素127mg，经HPLC检测，其含量为98.6%。

实施例3：