[发明专利]一种提取纯化沟果非洲砂仁素A的方法

说明书

技术领域

本发明属于天然药物领域，具体而言，本发明涉及一种提取纯化沟果非洲砂仁素A的方法。

背景技术

沟果非洲砂仁素A（Aulacocarpin A），是一种二萜类化合物，分子式：C₂₁H₃₂O₅，分子量：364.48，为无色棱晶，mp.102-103℃，CAS号：157878-18-7。主要存在于姜科（Zingiberaceae）植物沟果非洲砂仁的种子中，含量较高，其分子结构式如下：

现代药理研究表明，沟果非洲砂仁素A具有抗菌活性，其对枯草杆菌最低抑菌浓度为25μg/ml，对米黑毛霉最低抑菌浓度为50μg/ml。

经文献检索，尚无适用于高纯度沟果非洲砂仁素A的提取纯化方法报道。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种适用于规模化生产、产品纯度高的提取纯化沟果非洲砂仁素A的方法。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案如下：

一种提取纯化沟果非洲砂仁素A的方法，其特征在于按如下工艺步骤进行：

A.脱脂：取沟果非洲砂仁种子，加入2-3倍量的石油醚超声脱脂20-45分钟，过滤，挥去残留的石油醚；

B.提取：将脱脂后的沟果非洲砂仁药材加入4-8倍量体积百分比为70-95%的乙醇溶液，加热回流提取0.5-3小时，提取2次，过滤，合并两次提取液，浓缩得到含有沟果非洲砂仁素A的浓缩液；

C.大孔树脂柱层析：将所得浓缩液通过D101大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用90-95%乙醇洗脱，收集90-95%乙醇洗脱液，浓缩得浸膏；

D.硅胶柱层析：将所得浸膏与100-200目硅胶按重量比1:1-2拌匀，阴干；再取4-5倍的新鲜硅胶装于柱底，拌样硅胶装于其上，以正己烷-丙酮混合溶液进行梯度洗脱，按体积比由高到低，依次按100-5:1洗脱剂比例进行洗脱，收集含沟果非洲砂仁素A的洗脱液，回收试剂，得到沟果非洲砂仁素A浓缩液；

E.结晶：将沟果非洲砂仁素A浓缩液置于结晶罐中静置12-24小时使其结晶，过滤，滤出晶体，再采用两相溶剂进一步纯化得到纯度达98%的无色棱状结晶产品，所用结晶溶剂为石油醚-丙酮、二氯甲烷-乙酸乙酯或正己烷-二氯甲烷组合中的任意一种。

步骤D所述硅胶层析柱径高比为1:3-5。

本发明的有益效果是：本发明先进行脱脂处理，再采用乙醇回流提取，通过大孔树脂柱富集、短程柱层析后进行结晶，从而获得含量98%以上的沟果非洲砂仁素A；本发明步骤少、得率高、操作简便，易于规模化生产，所用试剂正己烷、丙酮等，可替代通常柱层析采用的氯仿、甲醇，降低毒性和污染。

具体实施方式

实施例1：

取沟果非洲砂仁种子粗粉500g，用石油醚1000ml超声脱脂30分钟，过滤，挥去残留的石油醚，用体积百分比为80%的乙醇溶液2500ml加热回流提取2小时，过滤，药渣再加2000ml80%乙醇溶液提取1.5小时，过滤，合并两次提取液，浓缩得到含有沟果非洲砂仁素A的浓缩液；将所得浓缩液通过D101大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用95%乙醇洗脱，收集95%乙醇洗脱液，浓缩得到浸膏；将所得浸膏与100-200目的硅胶按重量比1:1拌匀、阴干，再取4倍新鲜硅胶装于柱底，拌样硅胶装于其上，用正己烷-丙酮混合溶剂由高到低，依次按100:1、50:1、20:1、5:1体积比进行洗脱，收集含沟果非洲砂仁素A的洗脱液，回收试剂，将所得沟果非洲砂仁素A浓缩液置于结晶罐中静置20小时使其结晶，过滤，滤出晶体，采用石油醚-丙酮（4:1）进一步纯化得到无色棱状结晶产品1.0g，纯度为98.8%。

实施例2：