[发明专利]复合蛋白胶黏剂的制备方法

权利要求书

1.一种复合蛋白胶黏剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1)贻贝蛋白粉的制备：称取干净贻贝肉，加少量0.015～0.025mol·L^-1PBS缓冲溶液，用组织捣碎机捣碎；加入1.5～2.5倍液固比(v/w)的PBS缓冲溶液缓慢搅拌20～40min，在3～5℃提取20～28h，然后离心处理，取上清液；将提取的贻贝粗提液，在冰浴条件下，缓慢加入过量(NH₄)₂SO₄细颗粒，边加边搅拌，待(NH₄)₂SO₄细颗粒完全溶解，静置20～28h后低温高速离心，得贻贝(NH₄)₂SO₄沉淀蛋白，将沉淀蛋白用1.5～2.5倍液固比(v/w)的PBS缓冲溶液溶解，在3～5℃，PBS缓冲溶液透析过夜，冷冻干燥成粉，备用；

2)配制碱尿复合变性剂：取一定量的水，加入一定量的碱，使水溶液的pH值为9-10.5，然后加入一定量的尿素，使尿素的浓度为2～3.5mol/L得到碱尿复合变性剂；

3)在碱尿复合变性剂中加入1，2-苯并异噻唑啉-3-酮，使1，2-苯并异噻唑啉-3-酮的质量浓度为0.09～0.11％；

4)将步骤1)制得的贻贝蛋白粉与大豆蛋白按照贻贝蛋白粉占20～80％的质量比例混匀后，加入到步骤3)配制的溶液中，使液固比为10～15mL/g，于室温下搅拌2～4小时，使各组分充分均匀混合、反应，制得复合蛋白胶粘剂。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述步骤1)中的离心处理为二次离心，转速分别为4000～6000r·min^-1、13000～15000r·min^-1，时间分别为10～20min，15～25min。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述步骤1)中的低温高速离心是在3～5℃转速为13000～15000r·min^-1。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述步骤1)中贻贝肉组织捣碎机捣碎后加入2倍液固比(v/w)的PBS缓冲溶液，缓慢搅拌30min，在4℃提取24h。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述步骤1)中贻贝(NH₄)₂SO₄沉淀蛋白用2倍液固比(v/w)的PBS缓冲溶液溶解，在4℃，PBS缓冲溶液透析过夜。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述步骤2)中的碱为氢氧化钠。

7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述步骤3)中1，2-苯并异噻唑啉-3-酮的质量浓度为0.1％.

8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述步骤4)中贻贝蛋白粉与大豆蛋白按照贻贝蛋白粉占60％的质量比例混匀。