[发明专利]一株产杀/抗白蚁化合物的内生菌

说明书

技术领域

本发明涉及一株产杀/抗白蚁化合物的内生菌。

背景技术

白蚁Termite属于节肢动物门昆虫纲有翅亚纲等翅目的昆虫，是较为古老的社会性害虫。每年因白蚁危害建筑物和农作物所造成的经济损失达千亿美元以上。现有的杀灭白蚁的药剂均为化学药剂，故都有很大的毒副作用，造成严重的环境污染。利用生物技术开发具有高效、无毒、残效期长、对环境影响小的白蚁生物防治剂成为未来白蚁防治剂的主要方向。

白蚁等昆虫能消化木材中的木质纤维素，不是它们自身的本领，而是靠其后肠内的微生物的作用。白蚁若丧失了肠道中消化木质素和纤维素的微生物的作用，就会因为不能消化木材而死。研究者已经发现，美国路易斯安纳州的Juniperus virginiana和美国俄勒冈州的Chamaecyparis lawsoniana具有抗白蚁、抗腐蚀等特性，且从这两种树中分离到香榧醇、香柏酮等十多种具有抗白蚁作用的生物活性物质。据推测内生菌的基因可以和其寄生的树木基因相互传递，生活在植物体这一特殊环境中的内生菌能产生与宿主相同或相似的代谢产物，所以推测这类树的抗白蚁化合物可能由内生菌产生。另外，国外的研究也表明了植物内生菌的代谢产物对防治植物虫害具有潜在的应用和开发价值，所以从天然抗白蚁植物中筛选出可产生抗白蚁化合物的植物内生菌切实可行。目前，利用树木内生菌生物发酵合成的代谢产物防治白蚁在国内外尚未见有报道。

发明内容

本发明提供了一株产杀/抗白蚁化合物的内生菌，可以产杀/抗白蚁化合物，增加了能够发酵生产杀/抗白蚁化合物的微生物的数量，为利用内生菌生物发酵合成的代谢产物防治白蚁奠定了物质基础。

本发明产杀/抗白蚁化合物的内生菌为枯草芽孢杆菌新亚种HUB-I-47(Bacillus subtilis subsp.virginiana subsp.nov HUB-I-47)，保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏地址是武汉市武汉大学，保藏日期为2009年7月22日，保藏编号为CCTCC NO：M 209162；本发明枯草芽孢杆菌新亚种HUB-I-47革兰氏染色阳性，杆状，多呈单个存在或呈链状排列，菌体大小为(0.6μm～0.9μm)×(1.4μm～1.7μm)，无荚膜，产芽孢，芽孢椭圆中生，孢囊无明显膨胀，周生鞭毛，可运动，无伴孢晶体。枯草芽孢杆菌新亚种HUB-I-47在牛肉膏蛋白胨培养基上菌落呈白色，近圆形，不透明，表面干燥、无光泽，无明显皱褶状突起，边缘不整齐，中心略突出。

本发明枯草芽孢杆菌新亚种HUB-I-47可厌氧生长，具有运动性，过氧化酶试验呈阳性，V.P试验呈阳性，吲哚试验呈阴性，硝酸盐还原试验呈阳性，明胶水解试验呈阳性，酪蛋白水解呈阳性，淀粉水解试验呈阳性，可利用柠檬酸盐，不可利用丙酸盐、尿素，不能水解酪氨酸和精氨酸，能够分解葡萄糖、木糖、阿拉伯糖和甘露醇产酸。可在含有20g/LNaCl、50g/L NaCl或70g/L NaCl的培养基中生长，可在含有0.001％(质量)溶解酵素的培养基中生长。

本发明枯草芽孢杆菌新亚种HUB-I-47(Bacillus subtilis subsp.virginiana subsp.novHUB-I-47)通过16S rDNA序列比对分析，与芽孢杆菌属(Bacillus)内各种之间有极高的同源性，同源性为99％以上。与参考菌株枯草芽孢杆菌AS1.1098(B.subtilis AS1.1098)和枯草芽孢杆菌Ki-2-132(B.subtilis Ki-2-132)相比，本发明枯草芽孢杆菌新亚种HUB-I-47的菌体大小明显小于参考菌株(参考菌株菌体大小为0.7μm～0.8μm×2.0μm～3.0μm，呈链状排列)，且枯草芽孢杆菌新亚种HUB-I-47在培养过程中不产色素，而参考菌株在培养后期能够产生色素。本发明枯草芽孢杆菌新亚种HUB-I-47与参考菌株相比生长温度不同(参考菌株的最低生长温度为15℃、最高生长温度为50～55℃，最适生长温度为37℃)。通过结合菌体形态特征、生长条件、生理生化试验和分子生物学鉴定结果确定枯草芽孢杆菌新亚种菌株HUB-I-47属于芽孢杆菌属(Bacillus)，为枯草芽孢杆菌亚种(Bacillus subtilis subsp.virginiana D.P.Zhou，K.Zhao，J.Liu et W.X.Ping，subsp.nov)。

本发明枯草芽孢杆菌新亚种HUB-I-47可在牛肉膏蛋白胨培养基上生长。枯草芽孢杆菌新亚种HUB-I-47的最低生长温度为12℃、最高生长温度为47℃，最适生长温度为31℃。