[发明专利]一种微生物转化法生产麦角硫因的方法有效

专利信息
申请号: 201110261396.1 申请日: 2011-09-06
公开(公告)号: CN102978121A 公开(公告)日: 2013-03-20
发明(设计)人: 刘成航;刘岱琳;李长惠 申请(专利权)人: 天津市科曼思特医药科技发展有限公司
主分类号: C12N1/14 分类号: C12N1/14;C12P17/10;C12R1/645
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 300457 天津市经济技术开发*** 国省代码: 天津;12
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摘要:
搜索关键词: 一种 微生物 转化 生产 麦角 方法
【权利要求书】:

1.一株转化组氨酸制备麦角硫因的菌种,其分类命名为白香蘑菌(Lepista caespitosa(Bres.)Sing.).

用权力要求1所述的白香蘑菌(Lepista caespitosa(Bres.)Sing.)菌株转化组氨酸制备麦角硫因,其特征是:

菌株的培养:

出发菌株:白香蘑菌(Lepista caespitosa(Bres.)Sing.);

保藏培养基:葡萄糖营养琼脂培养基;

种子培养基:葡萄糖5-15g/L,蛋白胨1-4g/L,尿素1-5g/L,MgSO4.7H2O 0.1-3g/L,PH 7.0,去离子水配制;

种子培养条件:用250mL三角瓶装30-80mL种子培养基,按常规方法灭菌、冷却、接种后于26-30度,150-220r/min摇床培养12-36h做为种子培养液;

发酵培养基组成:葡萄糖5-15g/L,蛋白胨1-4g/L,尿素1-20g/L,MgSO4.7H2O 0.1-3g/L,PH7.0,去离于水配制;

发酵条件:用500mL三角瓶装100-300mL培养基,按常规方法灭菌,冷却,接种后于26-30度,150-220r/min摇床培养12-24h后添加1.5g/L的组氨酸作为底物继续培养12-24h。

2.生物转化:

将培养所得到的发酵液进一步处理得到的保菌体、冻干菌粉、透性化细胞或固定化细胞作为细胞生物催化剂;将组氨酸按照0.1%-75%的比例配制成水溶液作为生物转化底物反应液;将细胞生物催化剂,加入底物反应液进行转化反应;生物转化条件为:底物组氨酸浓度为0.1%-75%,细胞生物催化剂以游离细胞计对底物溶液的用量为10-200g/L;初始pH 5.0-10.0,转化反应温度为20-50℃,150-250r/min摇床培养,转化反应时间0.5-48h;

提纯与精制:将转化反应结束后的反应液用D001型强酸性苯乙烯树脂进行离子交换,去离子水洗脱,再经树脂D301纯化,去离子水洗脱,收集富含麦角硫因组分,浓缩,干燥后得到麦角硫因的提取物。

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