[发明专利]一种微生物转化法生产麦角硫因的方法有效
申请号: | 201110261396.1 | 申请日: | 2011-09-06 |
公开(公告)号: | CN102978121A | 公开(公告)日: | 2013-03-20 |
发明(设计)人: | 刘成航;刘岱琳;李长惠 | 申请(专利权)人: | 天津市科曼思特医药科技发展有限公司 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12P17/10;C12R1/645 |
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地址: | 300457 天津市经济技术开发*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 微生物 转化 生产 麦角 方法 | ||
1.一株转化组氨酸制备麦角硫因的菌种,其分类命名为白香蘑菌(Lepista caespitosa(Bres.)Sing.).
用权力要求1所述的白香蘑菌(Lepista caespitosa(Bres.)Sing.)菌株转化组氨酸制备麦角硫因,其特征是:
菌株的培养:
出发菌株:白香蘑菌(Lepista caespitosa(Bres.)Sing.);
保藏培养基:葡萄糖营养琼脂培养基;
种子培养基:葡萄糖5-15g/L,蛋白胨1-4g/L,尿素1-5g/L,MgSO4.7H2O 0.1-3g/L,PH 7.0,去离子水配制;
种子培养条件:用250mL三角瓶装30-80mL种子培养基,按常规方法灭菌、冷却、接种后于26-30度,150-220r/min摇床培养12-36h做为种子培养液;
发酵培养基组成:葡萄糖5-15g/L,蛋白胨1-4g/L,尿素1-20g/L,MgSO4.7H2O 0.1-3g/L,PH7.0,去离于水配制;
发酵条件:用500mL三角瓶装100-300mL培养基,按常规方法灭菌,冷却,接种后于26-30度,150-220r/min摇床培养12-24h后添加1.5g/L的组氨酸作为底物继续培养12-24h。
2.生物转化:
将培养所得到的发酵液进一步处理得到的保菌体、冻干菌粉、透性化细胞或固定化细胞作为细胞生物催化剂;将组氨酸按照0.1%-75%的比例配制成水溶液作为生物转化底物反应液;将细胞生物催化剂,加入底物反应液进行转化反应;生物转化条件为:底物组氨酸浓度为0.1%-75%,细胞生物催化剂以游离细胞计对底物溶液的用量为10-200g/L;初始pH 5.0-10.0,转化反应温度为20-50℃,150-250r/min摇床培养,转化反应时间0.5-48h;
提纯与精制:将转化反应结束后的反应液用D001型强酸性苯乙烯树脂进行离子交换,去离子水洗脱,再经树脂D301纯化,去离子水洗脱,收集富含麦角硫因组分,浓缩,干燥后得到麦角硫因的提取物。
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