[发明专利]洒金珊瑚的快速繁殖方法

说明书

技术领域

本发明属于植物离体组织培养方法技术领域，特别涉及植物洒金珊瑚的快速繁殖方法。

背景技术

洒金珊瑚学名Aucuba japonica Thunb．Variegata D'Ombr，别名花叶青木，金沙树（中国植物志第56卷第10页），洒金东瀛珊瑚，黄叶日本桃叶珊瑚，洒金桃叶珊瑚，属于山茱萸目，山茱萸科，桃叶珊瑚属。洒金珊瑚树形圆整，枝繁叶茂，叶片两面油绿而富光泽，叶面黄斑点点，酷似洒金，黄绿相映，凌冬不凋，植于庭园、墙隅、假山、池边、湖畔等庇荫处，很有观赏价值，是珍贵的耐阴观叶树种。洒金珊瑚茎、叶供药用，可治烫火伤，果实对艾氏腹水癌细胞有抑制作用，叶还可作牛、羊的饲料（王春梅主编.绿化树木选择.延边大学出版社,2000年04月第1版.第200-201页）。洒金珊瑚对烟尘及大气污染抗性强，是城市及工矿区绿化的好材料（沈宗英，白皋主编.家庭养花必备手册 （室内篇）.上海科学技术文献出版社,2008.1.）。洒金珊瑚还可以作为植物对“二甲苯”污染的指示植物（桂怿霖. 用洒金桃叶珊瑚监测室内装修污染.科学课.（小学版)2006年6月上半月.第54页）。洒金珊瑚在长江流域不易收到种子（裘文达. 花卉每月管理技术新编. 中国农业出版社 , 2006.01第231页），采用种子播种，发芽较迟，苗期生长缓慢（李国龙. 西充中学植物谱. 四川大学出版社 , 2009.4.第79页）。洒金珊瑚繁殖常用的方法是高空繁殖— 4月份选用树冠上生长1年以上的枝条，用刀进行环状剥皮，环宽1.5～2厘米，然后用手把糊状土粘在伤口上形成一个土球，土球直径4厘米(不能过大)，随即用塑料布把土球全部包好，再用塑料带从下往上绑扎，上下口要扎紧。此后保持土球湿润，对母株其他方面照常管理。8月中旬从母体上剪下栽植，前后需要120多天。也有用嫩枝扦插：取当年3月惊蛰萌发的叶芽，5月初扦插，9月中旬移栽，50天生根（夏雨书.洒金珊瑚的繁殖和栽培管理.中国花卉盆景.1994年第4期）等营养生殖方法繁殖，其繁殖方法受时间和其他条件限制。由于上述原因，洒金珊瑚播种繁殖的局限性，扦插的季节性限制等问题，一直阻碍着洒金珊瑚的快速大量繁殖，园林对洒金珊瑚的需求量大，洒金珊瑚的快速繁殖可以解决以上问题。现今洒金珊瑚的组织培养和快速繁殖的研究现查找不到相关资料。我们曾选用组织培养惯用的细胞分裂素6-BA与NAA或IBA等激素种类，以不同浓度组合配制而成的培养基对洒金珊瑚进行愈伤组织分化诱导，但未能使之分化。

发明内容

本发明的目的在于克服洒金珊瑚现有繁殖技术的不足，提供一种洒金珊瑚离体培养的快速繁殖方法。

本发明的洒金珊瑚快速繁殖方法的技术方案为：以洒金珊瑚的顶芽为外植体，经过消毒、灭菌、剥除外层鳞片叶，接种于启动诱导培养基中，培养基组分为MS+6-BA 0.8～1.2mg/L +NAA0.1～0.3mg/L＋蔗糖25～33g/L＋琼脂6～9g/L，启动诱导培养形成无菌芽，将无菌芽形成的愈伤组织切块儿接种到愈伤分化培养基中，其培养基组分为MS + TDZ 0.3～0.5mg/L + KT 0.3～0.6ml/L，愈伤分化培养出丛生芽，再将丛生芽接种到壮苗增殖培养基中，其培养基组分构成与启动诱导培养基相同，进行壮苗增殖培养得到不完全苗，然后将不完全苗转接到生根培养基中，培养基组分为1/2MS+NAA0.2～0.4mg/L，进行生根培养形成生根苗，生根苗经过炼苗、移栽得到再生植株。

顶芽消毒灭菌方法为：挑选洒金珊瑚的顶芽，用小毛刷刷洗干净，自来水冲洗2～3h，用75%体积分数的酒精溶液浸泡2～3min，取出后用无菌水冲洗3～5次，再用0.1%质量分数的升汞溶液浸泡6～8min，取出后用无菌水冲洗5次。

启动诱导培养、愈伤分化培养、壮苗增殖培养和生根培养条件均为pH值5.7-5.9，温度23～27⁰C，光照时间11～13h/d，光照强度2500Lux。 

启动诱导培养时间为20～25d，愈伤分化培养时间20-25d，壮苗增殖培养时间25-35d，生根培养时间28-32d。

炼苗、移栽步骤为；将生根苗瓶口打开，让苗与空气接触，控制湿度80～90%，温度20～22℃，时间3-5d，然后用流水洗去生根苗根部的培养基，用0.1%质量分数的高锰酸钾溶液浸泡1～2 min后取出，移栽到消毒的栽培基质中培养，栽培基质组分为泥炭土:蛭石=2:1，得到再生植株。

本发明技术方案通过以下步骤实现：