[发明专利]以BADH作为标记基因的植物转基因选择系统及其应用

权利要求书

1.以BADH作为标记基因的植物转基因选择系统，包含外源基因和选择剂，其特征在于：所述外源基因中含有作为选择标记基因的BADH，所述选择剂为NaCl。

2.根据权利要求1所述的植物转基因选择系统，其特征在于：所述植物为二色胡枝子或烟草。

3.权利要求1所述的以BADH作为标记基因的植物转基因选择系统在植物转基因工程中的应用，包括通过转基因方法将包含BADH作为选择标记基因的外源基因导入植物中，其特征在于：还包括下述步骤：

(1)、在转基因前的植物的组织或细胞培养基中加入不同浓度的NaCl，确定正好能抑制植物组织或细胞进行分化的NaCl浓度；

(2)、将获得的可能转化了外源基因的具有NaCl抗性的组织或细胞放置在步骤(1)所确定的NaCl浓度的培养基上进行培养，能够生长发育的即为转入了BADH作为选择标记基因的外源基因的材料。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：以BADH作为标记基因的植物转基因选择系统在二色胡枝子或烟草转基因工程中的应用。

5.根据权利要求4所述的应用，包括通过转基因方法将包含BADH作为标记基因的外源基因转入二色胡枝子中的步骤，其特征在于：还包括下述步骤：

(1)、在转基因前二色胡枝子子叶节不定芽分化的培养基中加入不同浓度的NaCl，确定正好能抑制二色胡枝子子叶节不定芽分化的NaCl浓度；

(2)、将上述转入了外源基因的二色胡枝子子叶节置于含有步骤(1)中确定的NaCl浓度的相同培养基中进行选择；

(3)、在转基因前二色胡枝子不定芽增殖和生根的培养基中加入不同浓度的NaCl，确定正好能抑制二色胡枝子不定芽增殖和生根的NaCl浓度；

(4)、将步骤(2)中获得的耐盐抗性芽在步骤(3)所确定的NaCl浓度的培养基中进行选择性增殖和生根，以加强选择效果。

6.根据权利要求4所述的应用，包括通过转基因方法将包含BADH作为标记基因的外源基因转入烟草叶片中的步骤，其特征在于，还包括下述步骤：

(1)、在转基因前烟草叶片不定芽分化的培养基中加入不同浓度的NaCl，确定正好能抑制烟草叶片不定芽分化的NaCl浓度；

(2)、将转入了外源基因的烟草叶片置于含有步骤(1)中确定的NaCl浓度的相同培养基中进行选择；

(3)、在转基因前烟草茎段增殖和组培苗生根的培养基中加入不同浓度的NaCl，确定正好能抑制烟草茎段增殖和组培苗生根的NaCl浓度；

(4)、将步骤(2)中获得的烟草耐盐抗性芽在步骤(3)所确定的NaCl浓度的培养基中进行选择性茎段增殖和组培苗生根，以加强选择效果。

7.根据权利要求3～6中任一权利要求所述的应用，其特征在于：在经过含NaCl培养基进行选择之后还包括经分子检测进行确定的步骤。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于：所述分子检测为PCR检测或Southern检测。