[发明专利]添加植物激素的培养基及其在裂殖壶菌发酵中的应用

说明书

技术领域

本发明属于微生物应用技术领域，具体涉及一种添加有植物激素的培养基及其在裂殖壶菌发酵中的应用。

背景技术

研究表明，以二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic acid，DHA，C22：6，n-3)为代表的n-3多不饱和脂肪酸(Polyunsaturated fatty acids，PUFAs)是必须脂肪酸，因为具有有益于人类健康的多种生理功能受到广泛的重视。DHA是大脑皮层和视网膜的关键组份，对婴幼儿视觉和神经系统的正常发育，维持视觉和神经系统的功能至关重要。另外，还具有预防心血管疾病、抗癌、抗炎等生理功能。

裂殖壶菌(Schizochytrium limacinum)是一种海洋真菌，这种真菌最显著的特点是细胞内积累大量的油脂，90％以上的油脂以人体易吸收的中性油脂-甘油三脂的形式存在。总脂肪酸中不饱和脂肪酸含量很高，主要为DHA。裂殖壶菌生长速度快，易于进行发酵生产。该物种使用安全，没有任何毒副作用，是一种生产DHA的理想的生物资源。本世纪以来，用裂殖壶菌发酵生产DHA取得了长足的进展，成为我国DHA的主要来源。

植物激素(plant hormone)是在植物体内合成，并从产生之处运送到别处，虽然浓度很低，但是对植物的生理过程及生长发育产生显著作用的生物活性物质。目前已发现的植物激素有细胞分裂素、生长素、赤霉素、乙烯和落叶酸5类，前三者为促进生长发育的激素，而后两者是负向激素，能够抑制生长发育。研究表明，有的真菌(如根瘤菌)能够直接合成或者诱导植物合成植物激素。植物激素对真菌的生长和代谢有也有一定的影响，杨中宝等(2005)研究了激素对丛枝菌根(Arbuscular mycorrhizae)侵染和产孢的影响；于建新等(2009)研究了菌根真菌生长及其与植物共生过程中可直接合成或诱导植物产生多种激素类物质，如生长素等，菌根真菌对植物激素种类、形态和含量的影响等。但还未见关于植物激素对裂殖壶菌的影响的报道。

发明内容

针对现有技术中还未有关于植物激素对裂殖壶菌影响的报道，本发明提供了添加植物激素的培养基及其在裂殖壶菌发酵中的应用，本发明通过在海洋真菌裂殖壶菌发酵生产时添加适当浓度的植物激素，达到了促进裂殖壶菌生长及提高DHA含量的目的。

为实现上述发明目的，本发明采用下述技术方案予以实现：

添加植物激素的培养基，它包括以下组分：

以葡萄糖为碳源，    浓度为10-100g/L；

以酵母提取物为氮源，浓度为10-80g/L；

海水                占培养基总体积的20％-80％；

分别添加6-苄基腺嘌呤、糠基氨基嘌呤、赤霉素、吲哚丁酸、萘乙酸和吲哚乙酸中的一种。

对上述技术方案的进一步改进：所述6-苄基腺嘌呤浓度为1-10mg/L；糠基氨基嘌呤浓度为1-20mg/L；赤霉素浓度为1-10mg/L；所述吲哚丁酸浓度为1-10mg/L；α-萘乙酸浓度为1-10mg/L；吲哚乙酸浓度为1-10mg/L。

对上述技术方案的进一步改进：所述葡萄糖的优化浓度为40-80g/L。

对上述技术方案的进一步改进：所述酵母提取物的优化浓度为20-60g/L。

对上述技术方案的进一步改进：所述海水占培养基的优化比例为30％-70％。

本发明还提供了添加植物激素的培养基在裂殖壶菌发酵中应用。

对上述技术方案的进一步改进：所述裂殖壶菌为裂殖壶菌OUC88，菌种保藏号：CGMCC NO.1240，保藏日期：2004.10.27。

对上述技术方案的进一步改进：所述裂殖壶菌以1-10％的接种量接入所述培养基中。

对上述技术方案的进一步改进：所述裂殖壶菌的发酵培养温度为18-30℃，pH值为4-8，转速为100-250rpm，振荡培养3-7天。

与现有技术相比，本发明的优点和积极效果是：本发明通过在裂殖壶菌发酵培养基中添加适宜浓度的植物激素，以检测植物激素对裂殖壶菌产生的影响，所述植物激素分别为细胞分裂素6-苄基腺嘌呤、糠基氨基嘌呤、赤霉素、植物生长素吲哚丁酸、萘乙酸和吲哚乙酸，它们单独添加均能显著提高裂殖壶菌生长速度和增加DHA含量；而且，采用本发明所述技术方案，可以显著降低裂殖壶菌的发酵成本，提高发酵效率，从而促进产业发展。

结合附图阅读本发明的具体实施方式后，本发明的其他特点和优点将变得更加清楚。

附图说明

图1表明本发明中6-BA对裂殖壶菌生长和DHA含量的影响。