[发明专利]吡唑啉类化合物的制备及其在抗癌治疗中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及吡唑啉类化合物及其制备方法与抗肿瘤药物。 

背景技术

癌症具有较高的发病率和致死率。严重威胁着人类的健康和生命。目前，化疗仍然是肿瘤治疗的主要手段之一，因此新药的开发研究也依然是攻克肿瘤的重要途径之一。目前，抗癌新药的开发对象主要包括天然物质、化学合成物质及生物技术合成物质等，而且开发一种新型的抗癌药物也是解决临床上多药耐药(multidrug resistance MDR)的途径之一. 

烟酸及其衍生物作为一种重要的天然药物成分，大量存在于活细胞中，有着广泛的生物学活性。先前大量的报道证明某些特定的取代基嘧啶及其大环衍生物有抗抑郁、抗菌、抗癌、止痛、抗痉挛等活性。吡唑啉类化合物作为其中一组化合物拥有广泛的药理特性：解热镇痛，抗风湿等。这类衍生物也被报道拥有较好的抗炎活性，被作为一个有效的抗糖尿病靶向基团进行研究。此外，大量报道中具有药理抗癌活性的化合物中都含有吡唑啉基团。最近，这些杂环氮衍生物已被证实具有二价阳离子载体潜能，并作用于硫氰酸盐选择性细胞膜传感器。 

前期工作中，我们已经合成了一批各种取代基的吡唑啉，并测试了其生物活性，此文中，这些吡唑啉和几种取代基烟酸、异氰酸苯酯及异硫氰酸苯酯通过酰胺键加成，形成了一系列的未经报道的新化合物。这些新化合物，可能体现出吡唑啉和酰胺、脲及硫脲在抗肿瘤中的协同性。我们测试了这批化合物的活性，并发现其对MCF-7细胞具有良好的抑制作用，引起细胞凋亡。 

发明内容

本发明的目的在于提供一类新型吡唑啉衍生物化合物以及它们的制备方法与用途。 

本发明的技术方案如下： 

1.一类吡唑啉衍生物，其特征是它有如下通式： 

结构式中R1为：吡啶基、6-氯吡啶基、6-甲基吡啶基、2-氯，6甲基-吡啶基、5-溴吡啶基、2-氯吡啶基。 

R2为：4-甲氧、4-氯。 

R3为：4-甲氧、4-氯、4-溴、4-氟、4-苄氧。 

R4为：硫原子、氧原子。 

2.一种制备上述的吡唑啉衍生物的方法，它由下列步骤组成： 

步骤1.制备查尔酮原料：将取代基苯甲醛(5.0mmol)，取代基苯乙酮(5.0mmol)分别溶于乙醇，缓慢滴入40％NaOH溶液10ml，磁搅拌，常温反应5小时(TLC检测反应进行程度)，产物以固体析出。反应结束后抽滤，并以大量的蒸馏水冲洗固体物，最后用乙醇洗涤3次，干燥得取代基查尔酮。将产物重结晶。 

步骤2.于50ml烧瓶中加入2mmol取代基查尔酮，0.4ml水合肼，并溶解于20mml正丙醇中，90℃搅拌反应10小时(TLC检测)。反应结束后，冷却到5℃以下，反应产物自动析出，抽滤并用乙醇洗涤2次，重结晶得到第二步产物。 

步骤3. 

(1)反应生成酰胺系列：将步骤2产物与取代基烟酸、EDC·HCl以1∶1.2∶1.2的摩尔比分别加入50ml烧瓶中，用20mlCH₂Cl₂溶解，45℃搅拌反应12小时(TLC检测)。反应结束，用真空将溶剂抽干，将烧瓶中残余固体溶于30ml乙酸乙酯中，用50ml 8％稀盐酸洗涤萃取3次。真空抽干萃取液，得到残余固体用乙醇重结晶，得到最终产物。 

(2)反应生成脲和硫脲系列：将步骤2产物与异氰酸苯酯或者异硫氰酸苯酯以1∶1.2的摩尔比分别加入50ml烧瓶中，用20ml氯仿溶解，50℃搅拌反应10 小时(TLC检测)。应结束，用真空将溶剂抽干，将烧瓶中残余固体溶于30ml乙酸乙酯中，用50ml 8％稀盐酸洗涤萃取3次。真空抽干萃取液，得到粗产物用乙醇重结晶后，得到最终产物。 

本发明的吡唑啉衍生物具有抑制MCF-7细胞增殖的作用。因此本发明的吡唑啉衍生物可做潜在的抗肿瘤药物。 

具体实施方式

实施例一：(5-(4-溴代苯基)-3-(4-氯代苯基)N-苯基-4，5-二氢-1氢-1-吡唑基)硫脲(化合物1)的制备