[发明专利]一种非小细胞肺癌标志物及应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别涉及一种肿瘤标志物及其应用。

背景技术

肺癌是呼吸系统常见的恶性肿瘤，被认为是癌症中的第一杀手。目前我国肺癌的5年生存率仅10％，只有15％的患者在确诊时病变局限，而大部分确诊时已失去手术机会，因此预后极差，病死率极高。         

肺癌的高病死率主要原因是由于无法做到早期诊断所致，因此，早期诊断肺癌是不失时机、及时规范治疗并改善其预后的最有效措施。目前影像学和纤维支气管镜检查是诊断肺癌的主要手段，与两者相比，肿瘤标志物检测具有简便、费用相对低、没有射线危害、风险小、病人容易接受等优点。

在临床上肿瘤标志物已成为肿瘤患者早期发现的重要检查指标之一。不但能提高早期诊断率，还对肺癌的治疗效果及预后判断起着重要指导作用。目前，常见的肿瘤标志物如CEA、CA125和CYFRA21-1等，被单独用于检测肿瘤包括非小细胞肺癌细胞或者联合应用，但是其特异性、敏感性有待进一步提高。

因此，寻找更多特异性敏感性更高的肺癌标志物，对目前诊断和治疗肺癌都有重大意义，已成为肺癌防治的当务之急。

STAT3是在1994年作为白细胞介素-6（IL-6）信号传递中的急性期反应因子（APRF）被纯化的，是一种存在于细胞浆与酪氨酸磷酸化信号通道耦联的双功能蛋白，广泛表达于不同类型的细胞和组织中。编码STAT3的基因在人类定位于第12号染色体（q13至q14-1）。在正常情况下，STAT3信号途径的激活是一个瞬时的过程，并受严密调控，参与细胞的增殖、分化及凋亡等，其持续激活却可致细胞异常增殖和恶性转化，阻止细胞凋亡，参与人类恶性肿瘤的发生发展和演进全过程。近年来发现STAT3在多种恶性肿瘤组织与细胞系中均有异常表达和活性增强。但STAT3其在肺癌患者尤其是非小细胞肺癌患者的组织及血液中的表达情况，及作为一种新的肺癌诊断的标志物可行性，以及其相关应用，目前尚无文献报道。

发明内容

本发明的发明目的之一在于：针对上述存在的问题，提供新的非小细胞肺癌诊断标志物。

本发明采用的技术方案是这样的：该标志物为STAT3。

进一步的：该标志物还包括CEA、CA125和CYFRA21-1，即采用STAT3与CEA、CA125和CYFRA21-1作为标志物物四项联检。

发明人主要通过以下的实验研究，为上述内容进行了充分的证明：

采用免疫组化、荧光定量PCR等方法测定人肺腺癌细胞A549和正常人胚肺细胞MRC -5中STAT3、CEA、CA125蛋白和mRNA的表达，同时对STAT3分别与CEA、CA125的相关性进行比较。免疫组织化学染色图像分析结果提示STAT3蛋白、CEA蛋白、CA125蛋白在人肺腺癌细胞A549中的表达水平均明显高于它们各自在正常人胚肺细胞MRC-5中的表达，它们各自在两组细胞中的表达差异有显著统计学意义。STAT3蛋白与CEA蛋白及CA125蛋白在人肺腺癌细胞A549中的表达呈正相关。荧光定量PCR技术结果显示STAT3、CEA、CA125和GAPDH扩增产物特异;扩增效率分别为96.97％、98.71％、95.17和％96.76％。STAT3 mRNA、CEA mRNA、CA125 mRNA在人肺腺癌细胞A549中的表达水平均明显高于它们各自在正常人胚肺细胞MRC-5中的表达,经统计学分析,它们各自在两组细胞中的表达差异具有统计学意义。STAT3 mRNA与CEA mRNA及CA125 mRNA在人肺腺癌细胞A549中的表达呈正相关。

本发明的发明目的之二在于提供STAT3作为非小细胞肺癌标志物在制备非小细胞肺癌诊断试剂中的应用。

作为优选：所述诊断试剂为试剂盒。

进一步的：所述试剂盒包括

以常规方法特异性扩增SATA3基因或转录本的引物；

或/和特异性识别STAT3基因或转录本的探针；

或特异性结合STAT3 蛋白的抗体或配体。

更进一步的：所述试剂盒还包括

DNA提取试剂；

或/和其他聚合酶链反应（PCR）试剂；

或酶联免疫检测（如ELISE）试剂。

发明人主要通过以下的实验研究，为上述内容进行了充分的证明：