[发明专利]一株能将奎宁酮转化为(S)-3-奎宁醇的红串红球菌及转化方法

权利要求书

1.红串红球菌Rhodococcus erythropolis WY1406，保藏单位为中国普通微生物菌种保藏中心，保藏编号为CGMCC No.5096。

2.由权利要求1所述菌株能转化奎宁酮为(S)-3-奎宁醇。

3.权利要求1所述菌株的发酵培养方法，其包括步骤：

1)种子培养

将红串红球菌Rhodococcus erythropolis WY1406接入灭菌后的种子液体培养基中，于30℃，200～250r/min培养20～36h，得到种子液，

液体培养基的配制如下：葡萄糖10～20g/L，蛋白胨5g/L，酵母提取物5g/L，氯化钠1g/L，pH为7.0；

2)发酵培养

将步骤(1)得到的种子液体按接种量1～5％接种到发酵培养基中进行发酵培养。培养条件：30℃，摇床转速200～250r/min，发酵时间24～36h，即得到红串红球菌的发酵液，

所述发酵培养基的成分为：蔗糖15～20g/L，酵母提取物7g/L，蛋白胨3g/L，磷酸二氢钾1g/L，磷酸氢二钾1g/L，硫酸镁0.5g/L，氯化钠1g/L，pH为7.0。

4.一种制备权利要求2所述的(S)-3-奎宁醇的方法，其包括如下步骤：

1)收集菌体：发酵培养权利要求1所述的菌株，得到发酵液，离心收集菌体，得到湿菌体；

2)转化反应：用磷酸氢二钾-磷酸二氢钾缓冲液洗涤湿菌体后重新悬浮于同一缓冲液中，再加入底物奎宁酮盐酸盐，添加葡萄糖，在20-60℃摇床上反应，反应10-48h后，停止反应；

3)分离纯化(S)-(+)-3-奎宁醇产品

反应液离心分离，上清液用无机碱调节pH值到9-14，然后减压旋蒸，得到的残留物用二氯甲烷等有机溶剂固液萃取，滤液旋干得部分(S)-3-奎宁醇产品，滤饼溶于二氯甲烷等有机溶剂中搅拌半小时后过滤，滤液旋干得到粗产品，再用丙酮等有机溶剂重结晶得另一部分(S)-3-奎宁醇产品。

5.本领域技术人员可以根据本发明作出各种改变或变形，只要不脱离本发明的技术思想，均属于本发明权利要求所定义的范围。