[发明专利]一种用于检测HPS的试剂盒有效
| 申请号: | 201110243935.9 | 申请日: | 2011-08-24 |
| 公开(公告)号: | CN102393456A | 公开(公告)日: | 2012-03-28 |
| 发明(设计)人: | 杨晓明;赵京超;洪海燕;许望翔;曹萌萌;刘晓彤;李冰 | 申请(专利权)人: | 北京正旦国际科技有限责任公司 |
| 主分类号: | G01N33/574 | 分类号: | G01N33/574 |
| 代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅 |
| 地址: | 102206 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 用于 检测 hps 试剂盒 | ||
1.一种用于检测Hepassocin的试剂盒,包括抗Hepassocin的抗体1和抗Hepassocin的抗体2,其中所述抗体1作为包被抗体,所述抗体2作为检测抗体;
所述抗体1为抗Hepassocin的单克隆抗体;所述抗体2为抗Hepassocin的多克隆抗体。
2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒中包括标准品,所述标准品为Hepassocin。
3.根据权利要求1或2所述的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒中包括样本稀释液、浓缩洗涤液、显色液、终止液、包被缓冲液、封闭液、标准品稀释液和检测抗体稀释液。
4.根据权利要求1-3中任一所述的试剂盒,其特征在于:
所述样本稀释液的组成:溶剂是20mM、pH6.0的PBS缓冲液,溶质及其在所述样本稀释液中的质量浓度或摩尔浓或体积浓度如下:0.2%明胶,0.2%酪蛋白,150mMNaCl,0.1ml/L吐温20,5%蔗糖,0.5/万溴钾酚紫,1ml/L防腐剂Proclin-300;
所述浓缩洗涤液的组成:溶剂是水,溶质及其在所述浓缩洗涤液中的浓度如下:116g/L Na2HPO4·12H2O,11.84g/L NaH2PO4·2H2O,180g/L NaCl,5ml/L吐温20,1ml/L防腐剂Proclin-300;
所述显色液由显色液A和显色液B组成;
所述显色液A的组成:溶剂是水,溶质及其在所述显色液A中的浓度如下:7.28g/L柠檬酸,23.75g/L磷酸氢二钠,0.5g/L过氧化氢尿;
所述显色液B的组成:溶剂是水,溶质及其在所述显色液B中的浓度如下:100ml/L甲醇,1g/L PVA,1.5g/L Na2S2O3,1ml/L HCl,0.03%(质量百分含量)TMB,1%(质量百分含量)DMSO;
所述终止液的组成:溶剂是水,溶质及其在所述终止液中的浓度如下:200ml/1.8L硫酸,1.35g/1.8L EDTA;
所述包被缓冲液的组成:溶剂是0.05M、PH值为9.6CB缓冲液,溶质及其在所述包被缓冲液中的质量浓度如下:1/20万染料;
所述封闭液的组成:溶剂是20mM、pH7.4的PBS缓冲液,溶质及其在所述封闭液中的质量浓度或摩尔浓度或体积浓度如下:20%小牛血清,0.5%酪蛋白,8%蔗糖,150mM NaCl,1ml/L防腐剂Proclin-300;
所述标准品稀释液的组成:溶剂是20mM、pH7.4的PBS缓冲液,溶质及其在所述标准品稀释液中的质量浓度或摩尔浓度或体积浓度如下:1%酪蛋白,8%海藻糖,3%甘露醇,1mM EDTA,0.5%甘氨酸,150mM NaCl,1ml/L防腐剂Proclin-300;
所述检测抗体稀释液的组成:溶剂是20mM、pH7.4的PBS缓冲液,溶质及其在所述检测抗体稀释液中的质量浓度或摩尔浓度或体积浓度如下:2%BSA,0.1%酪蛋白,150mM NaCl,0.1ml/L吐温20,5/万氨基比啉,1/20万染料,1ml/L防腐剂Proclin-300。
5.根据权利要求1-4中任一所述的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒中包括HRP,并且所述HRP和所述检测抗体以HRP标记检测抗体的形式存在。
6.根据权利要求1-5中任一所述的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒中包括包被有所述包被抗体的酶标板;
所述包被有所述包被抗体的酶标板按照如下方法制备:
将所述包被抗体溶于所述包被缓冲液中至包被抗体浓度为2μg/ml,得到混合液;将所述混合液加入微孔板的孔中,每孔0.1ml,在37℃放置2小时或在2-8℃放置16-20小时;再向每孔中加入所述封闭液,每孔0.2ml,在37℃放置2小时,得到所述酶标板。
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