[发明专利]线虫卵活体纯化提取剂及其使用方法有效
| 申请号： | 201110243564.4 | 申请日： | 2011-08-24 |
| 公开（公告）号： | CN102433295A | 公开（公告）日： | 2012-05-02 |
| 发明（设计）人： | 王云彪;武海涛;吴东辉 | 申请（专利权）人： | 中国科学院东北地理与农业生态研究所 |
| 主分类号： | C12N5/07 | 分类号： | C12N5/07 |
| 代理公司： | 哈尔滨市松花江专利商标事务所 23109 | 代理人： | 金永焕 |
| 地址： | 150081 黑龙*** | 国省代码： | 黑龙江;23 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 线虫 活体 纯化 提取 及其 使用方法 | ||
1.线虫卵活体纯化提取剂，其特征在于线虫卵活体纯化提取剂由试剂A和试剂B组成；其中试剂A由0.3～0.4g的氯化钠、1～1.5g的氢氧化钠、0.3～0.5g的磷酸氢二钠、1～1.5g的次氯酸钠、0.005～0.02g的硫酸镁、1～1.5g的氢氧化钾、0.1～0.3g的磷酸二氢钾和100mL的蒸馏水组成；试剂B由0.3～0.4g的氯化钾、0.2～0.3g的氯化钠、2～3g的磷酸钠和100mL的蒸馏水组成。
2.根据权利要求1所述的线虫卵活体纯化提取剂，其特征在于线虫卵活体纯化提取剂由试剂A和试剂B组成；其中试剂A由0.33g的氯化钠、1.10g的氢氧化钠、0.40g的磷酸氢二钠、1.11g的次氯酸钠、0.01g的硫酸镁、1.34g的氢氧化钾、0.20g的磷酸二氢钾和100mL的蒸馏水组成；试剂B由0.30g的氯化钾、0.25g的氯化钠、2.68g的磷酸钠和100mL的蒸馏水组成。
3.权利要求1所述的线虫卵活体纯化提取剂的使用方法，其特征在于线虫卵活体纯化提取剂的使用方法如下：一、取同种成熟雌性线虫加入到线虫卵活体纯化提取剂的试剂A中，震荡3～10min，然后以9000～13000r/min的转速离心1～3min，弃上清液留沉淀；二、向沉淀中加入线虫卵活体纯化提取剂的试剂B，然后以9000～13000r/min的转速离心1～3min，重复离心1～4次后取沉淀，即完成线虫卵活体纯化提取剂的使用；其中步骤一中线虫卵活体纯化提取剂由试剂A和试剂B组成，试剂A由0.3～0.4g的氯化钠、1～1.5g的氢氧化钠、0.3～0.5g的磷酸氢二钠、1～1.5g的次氯酸钠、0.005～0.02g的硫酸镁、1～1.5g的氢氧化钾、0.1～0.3g的磷酸二氢钾和100mL的蒸馏水组成；试剂B由0.3～0.4g的氯化钾、0.2～0.3g的氯化钠、2～3g的磷酸钠和100mL的蒸馏水组成；步骤一中试剂A的用量为1mL处理100只同种成熟雌性线虫；步骤一中试剂B的用量为1mL处理100只同种成熟雌性线虫。
4.根据权利要求3所述的线虫卵活体纯化提取剂的使用方法，其特征在于步骤一中震荡4～9min，然后以10000～12000r/min的转速离心1.5～2.5min。
5.根据权利要求3所述的线虫卵活体纯化提取剂的使用方法，其特征在于步骤一中震荡5min，然后以11000r/min的转速离心2min。
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