[发明专利]用于检测啤酒大麦品种和/或纯度的引物、试剂盒和方法有效
| 申请号： | 201110242721.X | 申请日： | 2011-08-23 |
| 公开（公告）号： | CN102952851A | 公开（公告）日： | 2013-03-06 |
| 发明（设计）人： | 吴亚君;陈颖;王斌;韩建勋;袁飞 | 申请（专利权）人： | 中国检验检疫科学研究院 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 隆天国际知识产权代理有限公司 72003 | 代理人： | 吴小瑛;菅兴成 |
| 地址： | 100123 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 检测 啤酒 大麦 品种 纯度 引物 试剂盒 方法 | ||
1.用于检测啤酒大麦品种和/或纯度的引物，其特征在于，所述引物的核苷酸序列为SEQ ID No.1-5所示。
2.用于检测啤酒大麦品种和/或纯度的RAPD试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含权利要求1所述的引物。
3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包含使用说明书，所述使用说明书中记载的随机PCR扩增反应条件是：94℃，10min；94℃1min，37℃1min，72℃2min，45个循环；72℃5min。
4.根据权利要求2或3所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包含用于提取样品DNA的试剂和用于随机PCR扩增反应的试剂。
5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包含标准品和阴性对照，所述标准品为啤酒大麦目标品系的DNA序列，所述阴性对照为无菌双蒸水。
6.检测啤酒大麦品种和/或纯度的RAPD方法，其特征在于，所述方法包括使用权利要求1所述的引物或权利要求2至5任一项所述的试剂盒。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤；
(1)提取啤酒大麦DNA模板；
(2)分别使用权利要求1所述的引物对于所述步骤(1)获得的啤酒大麦DNA模板进行随机PCR扩增；
(3)对所述步骤(2)随机PCR扩增获得的产物进行毛细管芯片电泳；
(4)根据所述步骤(3)获得的标志带图谱鉴定啤酒大麦的品种；和/或
(5)对于所述步骤(3)获得的标志带图谱绘制标准曲线，建立啤酒大麦纯度检测半定量模型，以判定啤酒大麦目标品种的纯度。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)的随机PCR扩增的条件被设定为：94℃，10min；94℃1min，37℃1min，72℃2min，45个循环；72℃5min。
9.根据权利要求6至8任一项所述的方法，其特征在于，所述方法能够鉴定选自下述的啤酒大麦品种：甘啤3号、甘啤4号、恳啤2号、恳啤3号、Harningtan、Copeland、Metcalfe、Baudlin、Hamelin、Legacy、Kendall、Stirling、Gairdner、Estevel、Cervoise、Flagship、Arturio、Vlamingh以及Newdale。
10.权利要求1所述的引物或权利要求2至5任一项所述的试剂盒在检测啤酒大麦品种和/或纯度中的应用。
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