[发明专利]甘露聚糖酶及其突变体有效
| 申请号: | 201110234218.X | 申请日: | 2011-08-16 |
| 公开(公告)号: | CN102277342A | 公开(公告)日: | 2011-12-14 |
| 发明(设计)人: | 黄亦钧;程斯达;许韡;王华明;陈亮珍;刘鲁民;陈刚 | 申请(专利权)人: | 青岛康地恩生物科技有限公司 |
| 主分类号: | C12N9/42 | 分类号: | C12N9/42;C12N15/56;C12N15/63;C12N1/21;C12N1/19;C12R1/19;C12R1/125;C12R1/10;C12R1/84 |
| 代理公司: | 北京汇泽知识产权代理有限公司 11228 | 代理人: | 张瑾 |
| 地址: | 266061 山东省青岛市崂*** | 国省代码: | 山东;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 甘露 聚糖 及其 突变体 | ||
1.重组甘露聚糖酶及其突变体,其中所述重组甘露聚糖酶的氨基酸序列:
(a)包含选自SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:8、、SEQ IDNO:10或SEQ IDNO:12其中之一;或者
(b)是在选自SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:8、、SEQ IDNO:10或SEQ ID NO:12其中之一上取代、缺失或添加一个或数个氨基酸残基得到。
2.权利要求1所述的重组甘露聚糖酶,其氨基酸序列为SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:4、SEQID NO:6、SEQ ID NO:8、、SEQ ID NO:10或SEQ ID NO:12。
3.编码权利要求1或2所述甘露聚糖酶的DNA分子。
4.权利要求3所述的DNA分子,其核苷酸序列为SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:9或SEQ ID NO:11。
5.一种重组表达质粒,其中含有权利要求3或4所述的DNA分子。
6.一种表达宿主,其被权利要求5所述的重组表达质粒转化。
7.权利要求6所述的表达宿主,其选自大肠杆菌(Escherichia coli)、酵母或芽孢杆菌。
8.权利要求6所述的表达宿主,其中所述的酵母是巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)。
9.权利要求6所述的表达宿主,其中所述的芽孢杆菌是枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)或地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)。
10.一种制备重组甘露聚糖酶的方法,该方法包括:
(a)提取地衣芽孢杆菌的基因组DNA;
(b)以提取的基因组DNA为模板,进行PCR扩增。
(c)将PCR扩增产物克隆入表达载体;
(d)用步骤(c)得到的重组表达载体转化表达宿主;
(e)分离、鉴定并纯化表达产物。
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