[发明专利]聚磷真菌深紫被孢霉

说明书

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，特别是涉及一种具有较强的聚磷能力的微生物菌株。

背景技术

聚磷菌是从工程的角度在污水生物除磷研究中对微生物的一种界定，将厌氧/好氧交替运行导致厌氧释磷、好氧超量吸磷的一类异养型细菌称为聚磷菌。早期的研究者认为聚磷菌属于不动杆菌属，但是后期研究者认为属于莫拉氏菌属、假单胞菌属、气单胞菌属等。由于聚磷菌只是按照超量聚磷这个生物化学过程来界定的，所以要真正界定聚磷菌还应该从细菌的微生物特性入手进行研究。

聚磷菌也叫做摄磷菌，是指体内能贮存聚磷和聚β-羟基丁酸的一类细菌的总称。一般认为主要有不动杆菌、假单胞菌属等菌种。聚磷菌是传统活性污泥工艺中一类特殊的兼性细菌，在好氧或缺氧状态下能超量地将污水中的磷吸入体内，使体内的含磷量超过一般细菌体内的含磷量的数倍，生物除磷主要是利用聚磷菌的聚磷作用。

发明内容

本发明的目的在于提供一种从松科植物云南松（Pinus yunnanensis faranch）植物根际土壤中，分离得到的具有高效聚磷活性的土壤真菌———聚磷真菌深紫被孢霉。

本发明所述的聚磷真菌深紫被孢霉系从松科植物云南松（Pinus yunnanensis faranch）植物根际土壤中分离得到。现在国家知识产权局认可的保藏单位保藏，保藏单位名称：中国典型培养物保藏中心，简称：CCTCC，保藏单位地址：中国.武汉.武汉大学，邮政编码：430072。保藏日期为2011年6月1日，保藏编号为CCTCC NO：M2011189。

本发明所述的聚磷真菌深紫被孢霉命名为深紫被孢霉YM323416（Mortierella vinacea YM323416），现保藏在国家知识产权局认可的保藏单位，保藏编号为CCTCC NO：M2011189。

菌株YM323416的显微形态特征：

①无性世代   菌丝无色有隔膜。分生孢子梗直立，不分枝，顶生分生孢子囊。分生孢子囊球形，无囊轴,10～12微米；分生孢子无色，单孢，多角形，3～4×3.8～5.2微米。

② 有性世代    未发现。

菌株YM323416的固体培养特征：

①PDA培养基28℃培养4天，菌落白色，中间有一圈粉红色同心圆，菌落生长较慢，菌落直径25mm，背面白色。7天菌落直径40mm，菌落不规则圆形，红色间有白色，绒絮状，致密较厚，边缘不整齐。背面白色。

②麦芽汁培养基28℃培养4天，菌落直径16mm，7天40mm，11天65mm。菌落圆形，白色，绒粉状，边缘不整齐，扁平较紧密。背面白色。

③察贝克培养基28℃培养4天，菌落直径6mm，7天12mm，11天26mm。菌落近圆形，边缘不整齐，白色，绒絮状，紧密。背面白色。

菌株YIM323416的液体发酵培养特征：

    ①PDA培养基，摇瓶培养5～9天。培养温度28℃。

    ②发酵培养特征：培养第1天，菌种有零星的白色菌丝点；培养第2天，长满白色菌丝；培养第3天，发酵液菌丝体密集，菌丝体呈白色；培养第4天，长满白色菌丝体，发酵液粘稠，培养第5～9天，发酵液菌丝体密集成絮状，白色菌丝体。

本发明所述的菌株YM323416的液体发酵工艺步骤为：菌种→试管斜面→种子培养→发酵培养→培养液离心→上清液→可溶性磷测定。此步骤中，发酵原料为改良的马铃薯葡萄糖液体培养基（PDA）。本工艺适合于小型丝状真菌类微生物。

    上述的液态发酵工艺中，发酵条件参数如下：

    （1）发酵方式：液态发酵。

    （2）菌种斜面：试管斜面菌种培养采用马铃薯葡萄糖固体培养基（PDA）。

（3）种子培养：种子培养为马铃薯葡萄糖液体培养基（PDA）。

     马铃薯葡萄糖液体培养基（PDA）制备：取新鲜马铃薯200g，去皮切成小块，加水1L煮沸30min，过滤弃马铃薯，滤夜加水补足至1|L，加入葡萄糖20g，PH自然。

上述马铃薯葡萄糖培养基中加入琼脂18g，即为固体PDA培养基。

改良的马铃薯葡萄糖液体培养基（PDA）制备：取新鲜马铃薯200g，去皮切成小块，加水1L煮沸30min，过滤弃马铃薯，滤夜加水补足至1L，加入葡萄糖20g，KH₂PO₄  1.7576g，PH 6.5。