[发明专利]前列腺干细胞抗原多肽与核酸的复合物及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明属于生物医药领域，涉及一种多肽与核酸的复合物，还涉及该复合物的制备方法和应用。

背景技术

前列腺癌是严重威胁中老年男性健康的恶性肿瘤之一，而且发病率逐年上升，死亡率高，仅次于肺癌，位居第二。50多年以来，雄激素阻断治疗一直是前列腺癌的标准疗法，然而，大多数患者最终会发展为激素抵抗性前列腺癌（hormone refractory prostate cancer, HRPC）。对于HRPC，目前尚无有效的疗法，而现有治疗手段包括放射治疗、化学治疗等均不能延长患者生命达一年以上。因此探索新型有效的前列腺癌治疗方法，一直是泌尿外科临床所面临的重要课题之一。

前列腺癌的免疫治疗是近年来倍受关注的研究热点。随着分子免疫学和肿瘤疫苗学的快速发展，细胞毒T淋巴细胞（cytotoxic T lymphocyte, CTL）在机体杀伤肿瘤过程中的重要作用得到深刻认识，利用CTL的特异性杀伤作用对肿瘤进行治疗已经成为颇具前景的肿瘤疗法。目前，已经有包括前列腺特异抗原（prostate-specific antigen, PSA），前列腺特异性膜抗原（prostate-specific membrane antigen, PSMA）和前列腺酸性磷酸酶（prostatic acid phosphatase, PAP）在内的数种前列腺癌相关抗原被鉴定，以这些抗原为靶标的疫苗被用于前列腺癌治疗研究，但临床试验显示，仅有约30%的患者有部分或完全的应答。树突状细胞（DC）疫苗一直被认为是最具前景的疫苗形式，但最近研究发现，一种负载PSA的DC疫苗虽然可诱发机体产生免疫应答，但参与临床实验的31例病人中只有3例PSA水平可降低至50%以上。因此，能用于特异性免疫治疗前列腺癌的新抗原一直处在积极的探索中。

前列腺干细胞抗原（prostate stem cell antigen, PSCA）是近来鉴定的一种前列腺癌相关抗原。与PSA、PSMA、PAP等前列腺癌相关抗原相比，PSCA具有以下明显优势：①PSCA仅表达于正常前列腺组织和前列腺癌细胞，在局部和发生骨转移的前列腺癌中呈过度表达，且表达密度随肿瘤分级和分期增高而增强，因此，对局部和发生骨转移的前列腺癌患者是一个良好靶标；②PSCA的表达具有前列腺特异性，PSCA特异性的CTL只杀伤前列腺正常细胞和癌细胞，不会伤害其他器官，而前列腺非生命必需的器官，因此，不会对患者生命造成威胁；③PSCA属GPI蛋白，其表达于前列腺癌细胞表面，且不会从细胞表面脱落，是潜在的抗体治疗靶标。

但如何提高这些潜在靶标的免疫原性来打破肿瘤抗原的自身耐受现象，是肿瘤疫苗设计中的一大难题。根据新近的疫苗学研究结果，某种疫苗接种机体后能否有效激发CTL应答的关键在于：疫苗抗原能否有效地被抗原递呈细胞（antigen presenting cell, APC）捕获，并进入MHC-I类抗原递呈途径，最终以“多肽-MHC-I类分子复合物”的形式呈现于细胞表面供初始型CD8⁺ T细胞识别。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的之一在于提供一种PSCA多肽与核酸的复合物，能够高效诱导PSCA特异性的CTL应答，有望打破肿瘤抗原的自身耐受现象。

为达到上述目的，本发明提供如下技术方案：

PSCA多肽与核酸的复合物，是由阳离子肽类DNA转运载体与PSCA表位肽PSCA_14-22形成的融合肽通过正负电荷相吸作用包装PSCA基因重组真核表达载体而得到的颗粒状复合物；所述阳离子肽类DNA转运载体位于融合肽的N端，PSCA表位肽PSCA_14-22位于融合肽的C端；所述PSCA表位肽PSCA_14-22的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示；所述PSCA基因重组真核表达载体含有核苷酸序列如SEQ ID No.2所示的人PSCA编码基因。

优选的，所述阳离子肽类DNA转运载体为由18个L-赖氨酸连接而成的多聚赖氨酸，在本发明中用K₁₈表示。K₁₈为生物可降解分子，不存在蓄积危害性。在本发明中，由K₁₈与PSCA_14-22形成的融合肽用K₁₈-PSCA_14-22表示。