[发明专利]一种柠檬酸发酵清液的分析方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种柠檬酸发酵清液的分析方法。 

背景技术

国内柠檬酸生产是以玉米等淀粉类物质为原料，在α-淀粉酶的作用下，使淀粉链中的α-1，4糖苷键被水解。支链淀粉的最终产物为葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖和α-极限糊精；直链淀粉的最终产物为葡萄糖、少量麦芽糖和麦芽三糖。糖的检测是控制柠檬酸生产过程的最常见的指标。目前，柠檬酸生产大多以费林法检测柠檬酸发酵液中的残糖，所述费林法检测柠檬酸发酵液中的残糖主要原理是：低聚糖在盐酸或酶的作用下，发生水解反应，生成具有还原性的单糖，所述单糖再用菲林试剂进行滴定，以次甲基蓝作为指示剂来检测糖的含量，但是该方法只能检测出残糖总量，而无法分析出各种糖的具体组分及其含量。此外，采用离子交换色谱对柠檬酸发酵清液进行分析，柠檬酸的特征峰出现在单糖和寡糖中间，因此，会影响检测结果的准确性，也无法有效分离柠檬酸与糖。 

发明内容

本发明的目的为了克服采用现有技术对柠檬酸发酵清液中的糖进行检测，只能检测出残糖总量，而无法检测出柠檬酸发酵清液中的糖的具体种类并无法准确定量各种糖的含量的缺陷，提供一种能够检测出柠檬酸发酵清液中的糖的具体种类并能够进行准确定量各种糖的含量的柠檬酸发酵清液的分析方法。 

本发明提供了一种柠檬酸发酵清液的分析方法，所述柠檬酸发酵清液含 有柠檬酸和糖，所述糖含有单糖和/或寡糖，其中，所述方法包括使用色谱柱，所述色谱柱包括串联的反相色谱分离柱和离子排斥色谱柱；在色谱分离条件下，将所述柠檬酸发酵清液和流动相的混合液从反相色谱分离柱的上端引入，依次与反相色谱分离柱和离子排斥色谱柱接触，并连续用淋洗剂洗脱所述反相色谱分离柱和离子排斥色谱柱，将流出液A从离子排斥色谱柱的下端引出，所述流动相的组成和色谱分离的条件使得糖中的各组分以及柠檬酸先后被分离出来，并经色谱分析后得到保留时间和积峰面积，通过与同等条件下得到的标准谱图对比得到柠檬酸发酵清液中糖的组成和糖中的各组分含量以及发酵清液中柠檬酸的含量；所述淋洗剂和流动相的组成相同。 

本发明的发明人经过深入地研究发现，采用本发明提供的方法对所述柠檬酸发酵清液进行分析，将所述柠檬酸发酵清液和流动相的混合液依次通过由反相色谱柱和离子排斥色谱柱的串联组成的色谱分离柱，可实现对所述柠檬酸发酵清液中的糖中的各组分以及柠檬酸发酵清液中的柠檬酸的有效分离，并经过色谱分析后，与同等条件下得到的标准谱图进行对比，从峰的位置和面积可进一步判断出柠檬酸发酵清液中的糖的各组分以及柠檬酸发酵清液中的柠檬酸的含量，为柠檬酸发酵工艺的参数调整提供数据参考，进而可以从根本上降低发酵液中残糖的含量，提高柠檬酸的产率。 

本发明的其他特征和优点将在随后的具体实施方式部分予以详细说明。

附图说明

图1为根据实施例1的方法得到的标准色谱图； 

图2为根据实施例2的方法得到的标准色谱图； 

图3为根据实施例3的方法得到的标准色谱图； 

图4为根据实施例4的方法得到的标准色谱图。 

具体实施方式

以下对本发明的具体实施方式进行详细说明。应当理解的是，此处所描述的具体实施方式仅用于说明和解释本发明，并不用于限制本发明。 

根据本发明提供的柠檬酸发酵清液的分析方法，所述柠檬酸发酵清液含有柠檬酸和糖，所述糖含有单糖和/或寡糖，其中，所述方法包括使用色谱柱，所述色谱柱包括串联的反相色谱分离柱和离子排斥色谱柱；在色谱分离条件 下，将所述柠檬酸发酵清液和流动相的混合液从反相色谱分离柱的上端引入，依次与反相色谱分离柱和离子排斥色谱柱接触，并连续用淋洗剂洗脱所述反相色谱分离柱和离子排斥色谱柱，将流出液A从离子排斥色谱柱的下端引出，所述流动相的组成和色谱分离的条件使得糖中的各组分以及柠檬酸先后被分离出来，并经色谱分析后得到保留时间和积峰面积，通过与同等条件下得到的标准谱图对比得到柠檬酸发酵清液中糖的组成和糖中的各组分含量以及发酵清液中柠檬酸的含量；所述淋洗剂和流动相的组成相同。