[发明专利]利用异源启动子控制大肠杆菌基因组N-乙酰基转移酶表达重组菌及应用

权利要求书

1.一种重组菌，为将胸腺素α的编码基因导入重组菌A中得到的重组菌；

所述胸腺素α为一种多肽或蛋白，其N末端的28个氨基酸残基与序列表中序列3的N末端的28个氨基酸相同或其N末端的28个氨基酸残基与序列表中序列3的N末端的28个氨基酸至少具有90％同源性；

所述重组菌A为将外源诱导型启动子插入宿主菌的乙酰基转移酶编码基因的上游，用于启动所述乙酰基转移酶编码基因的表达，得到的重组菌。

2.根据权利要求1所述的重组菌，其特征在于：

所述胸腺素α的编码基因通过重组载体导入所述的重组菌A；

所述重组载体为将所述胸腺素α编码基因插入表达载体中，得到表达胸腺素α的重组载体；

所述的诱导型启动子为乳糖启动子、阿拉伯糖启动子、碱性磷酸酯酶启动子、色氨酸启动子、噬菌体T7、P_L、P_R启动子或含有这些启动子部分元件的杂合启动子Tac、P_LP_R；

所述乙酰基转移酶为RimL或RimJ，

所述RimL为如下(a)、(b)或(c)所示的蛋白：

(a)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

(b)将序列表中序列2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的蛋白；

(c)与a)或b)限定的氨基酸至少具有90％同源性且具有相同功能的蛋白；

所述RimJ为如下(d)、(e)或(f)所示的蛋白：

(d)由序列表中序列8所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

(e)将序列表中序列8所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的蛋白；

(f)与d)或e)限定的氨基酸至少具有90％同源性且具有相同功能的蛋白。

3.根据权利要求1或2所述的重组菌，其特征在于：

所述胸腺素α编码基因为一种多核苷酸，其核苷酸序列为序列表中的序列4或与序列表中的序列4的5’末端起84位核苷酸相同或者与序列表中的序列4的5’末端起84位核苷酸同源性至少具有90％的DNA分子；

所述表达载体优选为pBV220或pET22b；

所述宿主菌为大肠杆菌；

所述诱导型启动子为噬菌体T7启动子或P_LP_R启动子，所述噬菌体T7启动子的核苷酸序列为序列表中序列5的自5’末端第1119-1135位核苷酸或序列表中序列6的自5’末端第1119-1135位核苷酸；所述P_LP_R启动子的核苷酸序列为序列表中序列9的自5’末端第2100-2411位核苷酸。

4.一种重组菌，为将外源诱导型启动子插入宿主菌的乙酰基转移酶编码基因的上游，用于启动所述乙酰基转移酶编码基因的表达，得到的重组菌。

5.根据权利要求4所述的重组菌，其特征在于：所述诱导型启动子为乳糖启动子、阿拉伯糖启动子、碱性磷酸酯酶启动子、色氨酸启动子、噬菌体T7、P_L、P_R启动子或含有这些启动子部分元件的杂合启动子Tac、P_LP_R。