[发明专利]一种鹤草酚的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于天然药物化学领域，特别是涉及一种鹤草酚的制备方法。

背景技术

鹤草酚（ Agrimophol）又叫仙鹤草酚，是一种间苯三酚类化合物，CAS号65792-05-4分子式C₂₆H₃₄O₈，分子量474.55，分子结构式：

鹤草酚，淡黄色结晶，熔点138.5-139.5℃。易溶于氯仿、苯，微溶于甲醇、乙醇，遇三氯化铁呈棕褐色，遇浓硫酸呈橙红色。鹤草酚对猪肉绦虫 囊尾蚴、幼虫、莫氏绦虫和短膜壳绦虫均有确切的杀虫作用。

仙鹤草为蔷薇科 Rosaceae龙芽草属 Agrimonia植物，又叫鹤草芽、龙牙草、施州龙牙草、瓜香草、黄龙尾等，全草含仙鹤草素、仙鹤草内酯、鞣质(为焦性儿茶酚鞣质、没食子鞣质等)、甾醇、有机酸、酚性成分、皂甙等，具有止血、杀虫、抗肿瘤作用。

现有从仙鹤草中提取鹤草酚的方法，多是采用硅胶柱分离。杜超采用通过溶剂提取及反复硅胶柱色谱,制备薄层，Sephadex LH-20和反复重结晶等手段制备得到鹤草酚等10个成分。传统的柱层析分离，会造成产品死吸附，导致产品收率低，而且操作复杂，一般较难放大和再现。

发明内容

本发明的目的克服现有技术的不足，提供一种鹤草酚的制备方法，该方法利用高速逆流色谱分离，操作简单，收率高。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：

一种鹤草酚的制备方法，其特征在于包含以下步骤：

1) 取仙鹤草药材粉碎，加5-10倍量60-90%乙醇溶液回流提取2-3次，提取液加活性炭脱色，过滤浓缩，浓缩液用氯仿萃取，萃取液回收试剂，得粗提物；

2）将上述粗提物采用高速逆流色谱分离，紫外检测器监测，根据图谱收集目标成分，流分减压回收试剂，干燥即得高纯度鹤草酚。

所述步骤2）中的高速逆流色谱溶剂系统可选正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水，配比2-5∶5-7∶3-5∶4-5，取上相做流动相，下相用磷酸二氢钠调节pH5-6做固定相。

所述步骤2）中的高速逆流色谱溶剂系统可选氯仿、甲醇、水，配比5-10:3-7:4-7，取下相做流动相，上相用三乙胺调节pH7.5-8做固定相。

本发明的优点是：方法采用高速逆流色谱法，这种方法是液液分配色谱，不产生死吸附，分离过程产品不损失，配合紫外检测器在线监测，操作简单，所得物质纯度高，制备周期短，制备量较大，可连续化生产。

 

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式

实施例1：

仙鹤草药材粉碎，称取2kg，加10倍量60%乙醇溶液回流提取2次，提取液加300g活性炭脱色，过滤浓缩至250ml，加氯仿萃取3次，萃取液回收试剂，得粗提物20g。取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水，按2∶5∶3∶4比例在分液漏斗中充分混合，取下相用磷酸二氢钠调节pH6充满高速逆流色谱柱中做固定相，转动主机，转速调节为800rpm，泵入上相，待建立动态平衡后，流速调节为2ml/min，同时取流动相溶解粗提物，由进样阀进样，根据紫外检测器图谱，收集目标成分，回收试剂，干燥得到1.2g鹤草酚，经HPLC检测，含量98.5%。

实施例2：

仙鹤草药材粉碎，称取2kg，加6倍量90%乙醇溶液回流提取3次，提取液加500g活性炭脱色，过滤浓缩至200ml，加氯仿萃取3次，萃取液回收试剂，得粗提物17g。取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水，按5∶7∶3∶5比例在分液漏斗中充分混合，取下相用磷酸二氢钠调节pH5充满高速逆流色谱柱中做固定相，转动主机，转速调节为900rpm，泵入上相，待建立动态平衡后，流速调节为3ml/min，同时取流动相溶解粗提物，由进样阀进样，根据紫外检测器图谱，收集目标成分，回收试剂，干燥得到1.3g鹤草酚，经HPLC检测，含量97.3%。

实施例3：