[发明专利]一种牛奶中人乳铁蛋白筛查试纸条及制备方法

权利要求书

1.一种牛奶中人乳铁蛋白免疫胶体金筛查试纸条，其包括样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫和PVC背衬，其特征在于，在PVC背衬(1)上依次搭接粘帖样品垫(3)、结合垫(4)、硝酸纤维素膜(2)及吸水纸(7)；所述的结合垫(4)上包被有兔抗人乳铁蛋白多克隆抗体；所述的硝酸纤维素膜(2)上分别包被有人乳铁蛋白的检测线(5)和山羊抗兔IgG的质控线(6))；

所述的兔抗人乳铁蛋白多克隆抗体是通过如下步骤制备得到的：

(1)对人乳铁蛋白进行分析，选择亲水性好、处于分子表面、柔韧性好且与牛乳铁蛋白同源性低的区段，人工合成一段抗原多肽，其蛋白质序列如序列表SEQ ID NO：2所示；

(2)将步骤(1)所示的多肽交联到载体蛋白匙孔血蓝蛋白上，得到复合蛋白，以该复合蛋白为抗原，通过免疫获得阳性血清，经亲和纯化后制备得到兔抗人乳铁蛋白多克隆抗体。

2.一种牛奶中人乳铁蛋白免疫胶体金筛查试纸条的制备方法，其包括如下步骤：

(1)用柠檬酸钠与氯金酸反应制备得到胶体金；

(2)将制备的抗人乳铁蛋白多克隆抗体加入步骤(1)制备的胶体金中，得到抗人乳铁蛋白多克隆抗体-胶体金标记物；

(3)将抗人乳铁蛋白多克隆抗体-胶体金标记物包被到结合垫(4)上；

(4)将人乳铁蛋白蛋白标准品包被到硝酸纤维素膜(2)上构成检测线(5)；并将山羊抗兔IgG包被到硝酸纤维素膜(2)上构成质控线(6)；

(5)在PVC背衬(1)上依次搭接粘帖样品垫(3)、结合垫(4)、硝酸纤维素膜(2)及吸水纸(7)，得到检测牛奶中人乳铁蛋白的免疫胶体金试纸条。

3.权利要求1所述的试纸条在筛查转人乳铁蛋白基因牛奶检测中的应用。