[发明专利]杭白菊中抗胃癌活性物质的半仿生提取方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种杭白菊中抗胃癌活性物质的半仿生提取方法。

背景技术

杭白菊是菊科植物菊(Chrysanthemum morifolium Ramat.)的干燥头状花序，主产浙江桐乡，是浙江省八大名药材“浙八味”之一。经现代医学证明：其具有止痢、消炎、明目、降压、降脂、强身的作用，可用于治疗湿热黄疸、胃痛食少、水肿尿少等症。目前，杭白菊中提取的有效成分包括绿原酸、挥发油和黄酮类化合物等。杭白菊的抗肿瘤作用也是其重要保健功效之一，有报道，杭白菊中挥发油中含有β-榄香烯，β-榄香烯具有广谱抗肿瘤作用。彭钰芳等从杭白菊中提取得到的木犀草素对乳腺癌细胞增殖具有抑制作用，且对正常细胞无影响。张涛等研究发现，不同提取方法获得的杭白菊提取物体外抗肿瘤作用强度不同，水相提取物优于油相提取物，水相极性提取物样本优于杭白菊黄酮类物质提取物。

根据文献查阅结果，目前只有浙江大学张涛报道了杭白菊提取物具有抑制胃癌细胞生长的作用，采用水浸提、乙酸乙酯提取，水提取物采用硅胶柱分离，获得三个样品(主要成分不详)，以上提取物对胃癌细胞均具有生长抑制作用，水相优于乙酸乙酯提取物，硅胶柱分离获得的三个样本中，极性大的样本抑制作用优于其他两个样本。

其余未见报道。

半仿生提取是以提取物的生物活性为导向模拟口服给药及药物经胃肠道转运，为经消化道给药的中药制剂设计的一种新型的更有效的提取方法，其较传统水煎中药法更注重药物在体内的活性。国内外学者已将半仿生法用于桂枝甘草汤、杜仲降压药等有效成分的提取，得到了良好的效果。而采用半仿生提取法分离杭白菊中的抗肿瘤成分至今未见报道。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种操作简便、生产成本低、提取效果好的杭白菊中抗胃癌活性物质的半仿生提取方法。

为了解决上述技术问题，本发明提供一种杭白菊中抗胃癌活性物质的半仿生提取方法，包括以下步骤：

1)、将干燥的杭白菊粉碎后过40-60目筛，然后加入pH为2.0-2.2的缓冲液I，置于36.5-37.5℃水浴中提取1-2小时；杭白菊与缓冲液I的料液比为1g/8-12mL；

提取结束后，过滤，弃去滤液I；

2)、在步骤1)所得滤渣中加pH为7.8-8.2的缓冲液II，置于36.5-37.5℃水浴中提取1-2小时，步骤1)中的杭白菊与缓冲液II的料液比为1g/8-12mL；

提取结束后，过滤，取滤液II；滤液II经干燥处理，得杭白菊抗胃癌提取物。

作为本发明的杭白菊中抗胃癌活性物质的半仿生提取方法的改进：步骤1)和步骤2)的提取均在搅拌状态下进行。

作为本发明的杭白菊中抗胃癌活性物质的半仿生提取方法的进一步改进：缓冲液I为所有pH为2.0-2.2的缓冲体系；缓冲液II为所有pH为7.8-8.2的缓冲体系。

作为本发明的杭白菊中抗胃癌活性物质的半仿生提取方法的进一步改进：pH为2.0-2.2的缓冲液I为甘氨酸-盐酸缓冲液、邻苯二甲酸-盐酸缓冲液、磷酸和磷酸二氢钠缓冲液或磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液等；

pH为7.8-8.2的缓冲液II为硼酸-硼砂缓冲液、磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲液、磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液、磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液或巴比妥钠-盐酸缓冲液等。

作为本发明的杭白菊中抗胃癌活性物质的半仿生提取方法的进一步改进：步骤2)的干燥处理为冻干处理。优选-50～-60℃冻干10～15小时。

本发明采用半仿生提取法来提取杭白菊中的抗胃癌活性物质，模仿口服药物在胃肠道的转运过程，采用选定pH值的酸性水和碱性水，依次连续提取得到活性物质。半仿生提取法与传统水提法比较，提取物活性高，抗胃癌效果好；与层析方法比较，操作方法简便可行，能够推广于工业化生产中。

采用本发明的方法所得的抗胃癌活性物质，使用方法如下：口服，剂量为5～15mg/kg/天。

具体实施方式

以下实施例中所述的干燥的杭白菊是指：杭白菊中的含水量≤5.0％。步骤1)和步骤2)的提取均在搅拌状态下进行。

实施例1、一种杭白菊中抗胃癌活性物质的半仿生提取方法，依次进行以下步骤：

1)粉碎干燥的杭白菊1克，过60目筛；加8ml的pH为2.0的缓冲液I(即，料液比为1g/8mL)；置于37℃水浴中提取2小时，该缓冲液I选用pH为2.0的甘氨酸-盐酸缓冲液；

提取结束后，过滤，弃去滤液I。