[发明专利]幽门螺杆菌抗原肽及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及免疫学领域，具体而言涉及包含幽门螺杆菌保护性抗原表位的抗原肽、包含所述抗原肽的多肽、其编码核酸、其抗体以及用于治疗、预防以及诊断幽门螺杆菌的相关疫苗、组合物和试剂盒。

背景技术

幽门螺旋杆菌(Helicobacter prlori，HP)是世界卫生组织认定的第一类致癌因子，在溃疡患者中HP的感染率为80％，健康人群为60％，60岁以上人群为70％。目前在一些发达国家，HP的感染率虽然有所下降，但仍存在大量感染者；而在发展中国家，HP的感染状况则更为严重。目前临床上常采用抗生素治疗HP感染，虽可在一定程度上治愈感染，但存在患者的依从性差、耐药菌株产生和反复感染等问题。大量的实验证明，免疫接种可预防甚至治疗HP感染，所以HP疫苗的研究具有深远的发展前景。

免疫学研究表明，尽管病原体存在多种抗原，但是其中具有诱导动物机体产生免疫应答功能，使动物获得免疫力的抗原只是极少数，这类抗原被称作保护性抗原。重要的是在一个保护性抗原分子中存在多个抗原表位，其中也只有个别抗原表位具有作用，它们被称作保护性抗原表位。然而HP的抗原成分很多。业已表明HP的尿素酶、过氧化氢酶以及外膜蛋白hp0231和hp0410是能诱导动物机体产生免疫应答的保护性抗原。然而，尚不知晓这些保护性抗原中的免疫保护性抗原表位。

传统的疫苗是以减毒或灭活的病原微生物作为免疫原。近年来，随着生物安全和食品安全在现代社会日益重要，由于减毒疫苗存在因病毒返祖或变异而产生强毒株的潜在可能，而灭活菌苗则由于免疫原性差，通常仅仅能够产生体液免疫，并且免疫力较低，免疫持续时间较短，需大剂量反复接种和添加佐剂来达到所需的保护性抗体水平。由全菌制成的灭活疫苗因其组分复杂而副作用较大，而且特别是灭活疫苗诱导的只是针对对应于此菌种的单一亚种的特异性免疫应答，所以，此疫苗只能预防该单一亚种相应的病原，为了预防细菌感染，人或动物例如家畜、禽类等在短时间内必须接种多种疫苗。由于疫苗剂型和种类不同，必须多次接种。然而，尤其对于家畜和禽类而言由此会产生应激反应等，从而影响其生长速度或产蛋量等。

核酸疫苗(nucleic acid vaccine)，也称基因疫苗(genetic vaccine)，是指将含有蛋白基因编码序列的质粒载体，经肌肉注射或微弹轰击等方法导入宿主体内，通过宿主细胞表达抗源蛋白，诱导宿主细胞产生对该抗原蛋白的免疫应答，以达到预防和治疗疾病的目的。与传统疫苗相比，核酸疫苗具有许多优越性：1.免疫保护力强，既可以产生体液免疫，也有细胞免疫，由于核酸疫苗接种后，系在机体细胞内表达免疫原，有利于MHC I类分子的抗原递呈，故可以诱生机体产生特异性细胞免疫反应(即特异性细胞毒性T淋巴细胞，CTL)，攻击已被感染且有相应抗原表达的宿主细胞，对寄生有病原微生物的宿主细胞乃至肿瘤细胞均具杀伤清除作用；2.核酸疫苗不存在传统减毒疫苗毒力回复的危险，理论上可兼具灭活疫苗与减毒疫苗之长；3.与传统的蛋白质疫苗相比，核酸疫苗的制备过程毋须涉及复杂的蛋白质纯化工艺，成本较低廉；4.同种异株交叉保护，即：在制备基因疫苗时，可通过对基因表达载体所携带的靶基因进行改造、嫁接与组合；5.应用较安全；6.产生持久免疫应答；7.核酸疫苗容易制备成多价疫苗，即可将编码不同抗原的基因构建在同一质粒中，或将不同抗原基因的多种重组质粒联合应用。8.核酸疫苗的质粒DNA稳定性好，便于贮存和运输，无须冷藏。正是由于上述特点，核酸免疫技术被誉为疫苗发展史上的第三次革命，成为生物技术领域研究的热点。

发明内容

本发明的目的是提供包含保护性抗原表位的幽门螺杆菌抗原肽、多肽、其编码核酸、其抗体、包含所述核酸的核酸疫苗、包含所述抗体的组合物等及其应用。

本发明涉及：