[发明专利]具有抗肿瘤活性的四个卡山烷型二萜类化合物

权利要求书

1.具有抗肿瘤活性的四个卡山烷型二萜类化合物，其特征在于其是由豆科植物喙荚云实的种子苦石莲中提取分离得到的，化学结构式为：

按照权利要求1所述的4个新的卡山烷型二萜类化合物，其特征在于：

化合物Ⅰ为Minaxin C[1α，6α，7β-triacetoxy-5α，13α，15β，16β-tetrahydroxy-12-oxocassane-14，16-epoxy]，分子式为C₂₆H₃₈O₁₂，系白色粉末，化合物Ⅰ为新化合物。

化合物Ⅱ为Neocaesalpin AA[1α，2α-diacetoxy-5α，14α-dihydroxy-12α-methoxycass-13(15)-en-16，12-olide]，分子式为C₂₅H₃₆O₉，系白色粉末，化合物Ⅱ为新化合物。

化合物Ⅲ为Neocaesalpin AB[1α-acetoxy-5α，7β-dihydroxy-12α-methoxycass-13(15)-en-16，12-olide]，分子式为C₂₃H₃₄O₇，系白色粉末，化合物Ⅲ为新化合物。

化合物Ⅳ为Neocaesalpin AD[1α-acetoxy-5α，7β-dihydroxy-12α-methoxycass-13(15)-en-16，12-olide-17β-carboxylate]，分子式为C₂₄H₃₄O₉，系无色固体，化合物Ⅳ为新化合物。

2.权利要求1所述的四个化合物Ⅰ-Ⅳ经肿瘤药效学实验证明，具有抗肿瘤活性。Minaxin A(化合物Ⅰ)、Neocaesalpin AA(化合物Ⅱ)、Neocaesalpin AB(化合物Ⅲ)、Neocaesalpin AD(化合物Ⅳ)对于人宫颈癌细胞Hela及人结肠癌细胞HCT-8的IC₅₀分别为40.0、39.8、31.6、32.8μg/ml及10.5、33.0、29.5、35.5μg/ml。

3.权利要求1所述的4个卡山烷型二萜(化合物Ⅰ-Ⅳ)的制备方法，包括以下步骤：

广西南宁采得喙荚云实的种子苦石莲8.0kg，由广西药用植物研究所袁经权研究员鉴定为[Caesalpinia minax Hance]。苦石莲8.0kg粉碎后，甲醇加热回流提取二次，每次二小时，合并提取液，减压回收溶剂，浓缩后得总浸膏2020g。苦石莲总浸膏用氯仿-甲醇溶解后，与100～200目的硅胶拌样，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、丙酮、甲醇洗脱，洗脱液减压浓缩，最终得到石油醚部分130g，氯仿部分325g，乙酸乙酯部分160g，丙酮部分305g，甲醇部分1100g。(提取流程见附图5所示)。取氯仿部分经硅胶柱层析，用石油醚-乙酸乙酯洗脱剂1∶0-1∶1梯度洗脱，得到12个馏分(Fr.A-L)，从中选取馏分C(15.4g)，馏分D(8.9g)，馏分E(6.8g)经LH20凝胶柱层析，以氯仿-甲醇40∶60洗脱除去色素。馏分C经反相MCI柱层析，以甲醇-水(30∶70-100∶0)梯度洗脱，得到8个组分(C1-C8)。C7-C8经薄层检识后合并，合并组分以甲醇-水(60∶40)经反相高压制备色谱分离，得到化合物Ⅰ(10.0mg)。馏分D经反相MCI柱层析，以甲醇-水(30∶70-100∶0)梯度洗脱，得到6个组分(D1-D6)。D2-D3经薄层检识后合并，合并组分经300～400目硅胶柱层析，氯仿-石油醚(1∶1-1∶0)梯度洗脱，得到化合物Ⅱ(8.0mg)，化合物Ⅲ(5.3mg)。馏分E经中压制备液相，以甲醇-水(40∶70-100∶0)梯度洗脱，得到4个组分(E1-E4)。E2组分以甲醇-水(68∶32)经反相高压制备色谱分离，得到化合物Ⅳ(8.2mg)。